肠道致病菌检验技术.ppt

志贺氏菌在TSI生长的结果（现象）：（1）斜面产碱仍为红色或粉红色；（2）底层产酸不产气，变黄色；（3）不产H2S，不出现黑色。志贺氏菌在半固体培养基生长：沿线生长，无动力。第64页,共70页，星期六，2024年，5月在志贺氏菌检验中可弃去的培养物：（1）在TSI表面上呈现蔓延生长的培养物（2）在18~24h发酵乳糖、蔗糖的培养物（3）不分解葡萄糖，只在半固体培养基表面生长的培养物。（4）产气的培养物（5）有动力的培养物（6）产H2S的培养物第65页,共70页，星期六，2024年，5月4、血清学试验和生化鉴定试验（1）血清学分型：凡凝为志贺氏菌，挑取三糖铁琼脂上的培养物，做玻片凝集试验。先用4种志贺氏菌多价血清检查，如果由于K抗原的存在而不出现凝集，应将菌液煮沸后再检查；如果呈现凝集，则用A1、A2、B群多价和D群血清分别试验。如系B群福氏志贺氏菌，则用群和型因子血清分别检查。福氏志贺氏菌各型和亚型的型和群抗原见表1。可先用群因子血清检查，再根据群因子血清出现凝集的结果，依次选用型因子血清检查。4种志贺氏菌多价血清不凝集的菌株，可用鲍氏多价1、2、3分别检查，并进一步用1～15各型因子血清检查。如果鲍氏多价血清不凝集，可用痢疾志贺氏菌3～12型多价血清及各型因子血清检查。第66页,共70页，星期六，2024年，5月（2）进一步的生化试验葡萄糖铵-西蒙氏柠檬酸盐-赖氨酸和鸟氨酸脱羧酶-pH7.2尿素-KCN生长-水杨苷和七叶苷的分解-第67页,共70页，星期六，2024年，5月（3）生化分群五项生化试验：乳糖甘露醇棉子糖甘油发酵靛基质试验，第68页,共70页，星期六，2024年，5月5、结果报告：综合生化血清学试验结果判定菌群，菌型，并做出报告。第69页,共70页，星期六，2024年，5月感谢大家观看第70页,共70页，星期六，2024年，5月**×（3）、典型沙门氏菌的五项生化反应及其检验的利用A、典型五项生化反应：A1H2S（+）靛基质（-）PH7.2尿素酶（-）KCN（-）赖氨酸脱羧E（+）第32页,共70页，星期六，2024年，5月B、利用五项生化反应鉴定沙门氏菌的最简单方案a、对于H2S阳性菌，利用五项生化反应试验可判别沙门氏菌和柠檬酸杆菌。b、对于H2S阴性菌，查到B1时即：H2S（-）靛基质（-）PH7.2尿素酶（-）KCN（-）赖氨酸脱羧E（+），补做ONPE试验，可判定沙门氏菌属和埃希氏菌属（ONPE（-）为沙门氏菌，ONPE（+）大肠艾希氏菌第33页,共70页，星期六，2024年，5月5、血清学试验（最后鉴定）（1）、沙门氏菌诊断血清的种类：10种组合血清：主要用于伤寒和副伤寒沙门氏菌鉴定26种组合血清：常见致病菌的定群与分型57种组合血清：常见定型，初步鉴定A—F群以外的菌型144种组合血清：全套装第34页,共70页，星期六，2024年，5月（2）、血清学检验步骤抗原准备→→A—F多价血清检验（判定是否是沙门氏菌）→→群特异性抗体血清（如O2、O4、O3、O7、O8、O9、O10、O11（判定O群别）→→O单因子血清检查→→H因子血清检查（分型）→→报告第35页,共70页，星期六，2024年，5月五、检验结果的报告1、凡血清学鉴定与生化反应均符合者，报告发现沙门氏菌。经检验，×××食品发现有沙门氏菌2、凡血清学鉴定与生化反应均不符合者，报告未发现沙门氏菌。第36页,共70页，星期六，2024年，5月思考题：1、典型沙门氏菌的五项生化试验结果如何？2、沙门氏菌的形态特征，培养特性是什么？3、沙门氏菌检验时为什么要进行前增菌和增菌？4、沙门氏菌有哪些抗原？各有何特点？O、H抗原如何表示，A—F群沙门氏菌中，代表每群O特异性抗原的独特因子是什么？第37页,共70页，星期六，2024年，5月5、沙门氏菌哪几个菌型具有Vi抗原，Vi抗原对O抗原血清涟试验有何影响，对含Vi抗原菌，如何做O抗原血清学试验。6、沙门氏菌在SS平板，TSI培养基上生长的现象如何，说明其原理。7、分离纯化后怎样选用最少的生化试验方法初步鉴定检验菌是否是沙门氏菌属的细菌。8、如何进行沙门氏菌的血清学试验。第38页,共70页，星期六，2024年，5月第三节、志贺氏菌的检验一、生物学特性（一）、形态与染色革兰氏阴性短杆菌、无荚膜，无芽胞，无鞭毛