TGXAS489-2023 非洲猪瘟病毒、猪瘟病毒和猪非典型瘟病毒鉴别检测 多重RT-PCR和多重qRT-PCR法.pdf

ICS11.220

CCSB41

GXAS

团体标准

T/GXAS489—2023

非洲猪瘟病毒、猪瘟病毒和猪非典型瘟病毒

鉴别检测多重RT-PCR和多重qRT-PCR法

EstablishmentofmultiplexRT-PCRandmultiplexqRT-PCRfordifferential

detectionofASFV,CSFVandAPPV

2023-05-10发布2023-05-16实施

广西标准化协会发布

T/GXAS489—2023

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定

起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。

本文件由广西兽医协会提出并归口。

本文件起草单位：广西壮族自治区动物疫病预防控制中心、广西农垦永新畜牧集团西江有限公司、

广西中科基因科技有限公司、广西民生中检联检测有限公司。

本文件起草人：施开创、冯淑萍、屈素洁、林昌华、龙凤、文金华、文愈、尹彦文、张胜斌、宋靖

萱、黄海愉、蒋家霞、陆文俊、谢守玉、黄美芝、李军。

I

T/GXAS489—2023

非洲猪瘟病毒、猪瘟病毒和猪非典型瘟病毒鉴别检测多重RT-PCR

和多重qRT-PCR法

1范围

本文件规定了用于鉴别检测非洲猪瘟病毒、猪瘟病毒和猪非典型瘟病毒的多重RT-PCR和多重

qRT-PCR法，包括原理、试验条件、试剂、主要仪器设备、样品采集与处理、多重RT-PCR检测、多重

qRT-PCR检测、阴性及阳性对照和结果判定等技术要求。

本文件适用于非洲猪瘟病毒、猪瘟病毒和猪非典型瘟病毒核酸的检测。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，

仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本

文件。

GB/T18648非洲猪瘟诊断技术

GB19489实验室生物安全通用要求

NY/T541兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范

3缩略语

下列缩略语适用于本文件。

ASFV：非洲猪瘟病毒（AfricanSwineFeverVirus）

CSFV：猪瘟病毒（ClassicalSwineFeverVirus）

APPV：猪非典型瘟病毒（AtypicalPorcinePestivirus）

RT：反转录（ReverseTranscription）

PCR：聚合酶链反应（PolymeraseChainReaction）

RT-PCR：反转录聚合酶链反应（ReverseTranscriptionPolymeraseChainReaction）

qRT-PCR:实时荧光定量反转录聚合酶链反应（QuantitativeReal-timeRT-PCR）

Ct值：每个反应管内的荧光信号量达到设定的阈值时所经历的循环数（Cyclethreshold）

4原理

4.1根据ASFV、CSFV和APPV基因特定序列的保守区域，