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专题二十六基因工程及生物技术安全与伦理问题
基础篇固本夯基
考点一基因工程的工具与基本操作
1.(2024届常州新桥中学月考,15)下列关于基因工程的叙述,错误的是(多选)()
A.质粒都以抗生素合成基因作为标记基因且不能有限制酶的酶切位点
B.农杆菌转化法可将目的基因随机插入受体细胞的染色体DNA
C.E.coliDNA连接酶既可连接黏性末端又可以连接平末端
D.构建基因表达载体时需要在目的基因上游加上起始密码子
答案ACD
2.(2024届南通期中,19)下列有关人胰岛素基因表达载体的叙述,错误的是(多选)()
A.基因表达载体中的胰岛素基因可通过人胰岛A细胞mRNA逆转录获得
B.借助抗生素合成基因可将含胰岛素基因的受体细胞筛选出来
C.构建胰岛素基因表达载体需要限制酶和DNA连接酶
D.启动子和终止密码子均在胰岛素基因的转录中起作用
答案ABD
3.(2024届江苏百校联考,18)重叠延伸PCR技术是一种通过寡聚核苷酸链之间重叠的部分互相搭桥、互为模板,经过多次PCR扩增,从而获得目的基因的方法。该技术在扩增较长片段的DNA、不同来源的DNA片段拼接、基因的定点诱变等方面具有广泛的应用前景,如图表示利用重叠延伸PCR技术扩增某目的基因的过程。下列叙述正确的是(多选)()
A.引物中G+C的含量越高,引物与模板DNA结合的稳定性越高
B.在第一阶段由于引物2和引物3发生碱基互补配对,因此两者置于不同反应系统中
C.引物1、2组成的反应系统和引物3、4组成的反应系统中均进行一次复制,共产生4种双链DNA分子
D.在引物1、2组成的反应系统中,经第一阶段要形成图示双链DNA,至少要经过3次复制
答案AB
4.(2024届如皋中学阶段考,19)农杆菌Ti质粒上的T-DNA可以转移并随机插入被侵染植物的染色体DNA上。研究者将如图中被侵染植物的DNA片段连接成环,并以此环为模板,利用PCR技术扩增出T-DNA插入位置两侧的未知序列,以此可确定T-DNA插入的具体位置。下列说法正确的是(多选)()
A.进行PCR扩增的依据是DNA分子双链复制的原理
B.进行PCR扩增需要的酶有解旋酶和热稳定的DNA聚合酶
C.利用图中的引物②、③组合可扩增出两侧的未知序列
D.通过与受体细胞的基因组序列比对,可确定T-DNA的插入位置
答案AD
5.(2018北京理综,5,6分)用XhoⅠ和SalⅠ两种限制性核酸内切酶(限制性内切核酸酶)分别处理同一DNA片段,酶切位点及酶切产物分离结果如图。以下叙述不正确的是()
图1酶切位点图
图2电泳结果示意图
A.图1中两种酶识别的核苷酸序列不同
B.图2中酶切产物可用于构建重组DNA
C.泳道①中是用SalⅠ处理得到的酶切产物
D.图中被酶切的DNA片段是单链DNA
答案D
6.(2017北京理综,5,6分)为了增加菊花花色类型,研究者从其他植物中克隆出花色基因C(图1),拟将其与质粒(图2)重组,再借助农杆菌导入菊花。
下列操作与实验目的不符的是()
A.用限制性核酸内切酶(限制性内切核酸酶)EcoRⅠ和连接酶构建重组质粒
B.用含C基因的农杆菌侵染菊花愈伤组织,将C基因导入细胞
C.在培养基中添加卡那霉素,筛选被转化的菊花细胞
D.用分子杂交方法检测C基因是否整合到菊花染色体上
答案C
7.(2024江苏,33,8分)如果已知一小段DNA的序列,可采用PCR的方法,简捷地分析出已知序列两侧的序列,具体流程如图(以EcoRⅠ酶切为例):
请据图回答问题:
(1)步骤Ⅰ用的EcoRⅠ是一种酶,它通过识别特定的切割特定位点。?
(2)步骤Ⅱ用的DNA连接酶催化相邻核苷酸之间的3-羟基与5-磷酸间形成;PCR循环中,升温到95℃是为了获得;TaqDNA聚合酶的作用是催化。?
(3)若下表所列为已知的DNA序列和设计的一些PCR引物,步骤Ⅲ选用的PCR引物必须是(从引物①②③④中选择,填编号)。?
DNA序列(虚线处省略了
部分核苷酸序列)
已知
序列
PCR
引物
①5-AACTATGCGCTCATGA-3
②5-GCAATGCGTAGCCTCT-3
③5-AGAGGCTACGCATTGC-3
④5-TCATGAGCGCATAGTT-3
(4)对PCR产物测序,经分析得到了片段F的完整序列。下列DNA单链序列中(虚线处省略了部分核苷酸序列),结果正确的是。?
A.5-AACTATGCG…………AGCCCTT-3
B.5-AATTCCATG…………CTGAATT-3
C.5-GCAATGCGT……
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