透射电子显微镜技术课件-PPT.ppt

透射电子显微镜技术;电子显微镜概述;电子显微镜概述;电子显微镜概述;电子束与物质的作用;一、电子显微镜发展史;ErnstRuskaGerdBinnigHeinrichRohrer

因为发明EM和STM而分享1986年的诺贝尔物理学奖;二、电子显微镜基本类型;;俄歇电子;我室现有两台电子显微镜;三、电子显微镜的基本结构;电子光学系统;SectionsofTEM:100nm

人甲状旁腺细胞，胞质内粗面内质网短而多层排列，为内分泌细胞粗面内质网（↑）的特点。

早期的透射电子显微镜都是基于这种原理。

根据波动学说，运动着的电子可以看作是一种电子波。

1918流感病毒即为西班牙流感病毒

图像的聚焦是靠调节物镜电流来实现的

CDC发表的1976年流行的猪流感病毒照片

放大率50～500000

支持膜：贴附于载网，用来观察悬浮的病毒、脂质体及其它颗粒物质的均质性膜，包括Formvar膜、碳膜等。

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指电子图像对于所观察试样区的线性放大率。

光学显微镜中图像的衬度（即对比度或反差）决定于样品上各部位对光的不同吸收。

Thinsections

普通TEM的最高V一般为100kV和200kV，通常所说的V是指可达到的最高加速电压。

大鼠脑神经细胞，胞质内可见散在粗面内质网（↑），游离多聚核糖体及线粒体（▲）。

Lens

线分辨率：能分辨两条线之间的最短距离，通过拍摄已知晶体的晶格象测定，又称晶格分辨率。

观察细胞内部结构

人鼻咽部上皮细胞核内可见多个聚集的染色质间颗粒（↑），及核模邻近单个的染色质周颗粒（▲）。

人胃粘液腺细胞间腺腔，表面有微绒毛（↑），有纵切及横切面，细胞间有紧密连接（▲）×20000

高真空、高电压、能够散射电子;细胞学和分子生物学中的应用;骨骼肌肌丝纵断面SEM×30000;骨骼肌肌丝纵断面TEM×29000;骨骼肌肌丝横断面TEM×40000;解剖学中的应用;病毒研究方面的应用;H1N1流感病毒;临床超微病理诊断中的应用—肾活检;肌营养不良;婴儿肝炎综合症;临床超微病理诊断中的应用—神经活检;临床超微病理诊断中的应用—皮肤活检;临床超微病理诊断中的应用;人甲状旁腺细胞，胞质内粗面内质网短而多层排列，为内分泌细胞粗面内质网（↑）的???点。

图像的聚焦是靠调节物镜电流来实现的

人胃粘液腺细胞间腺腔，表面有微绒毛（↑），有纵切及横切面，细胞间有紧密连接（▲）×20000

人鼻咽部纤毛上皮细胞间紧密连接（黑“↑”）。

HITACHIH-7500

这种衬度称散射吸收衬度，可以提供样品形态方面的信息。

免疫凝集电镜技术：即采用抗原抗体凝集反应后，再经负染色直接在电镜下观察

光学显微镜中图像的衬度（即对比度或反差）决定于样品上各部位对光的不同吸收。

SpecimenPreparationforElectronMicroscopy

(IlluminationSource)

SectionsofTEM:100nm

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点分辨率：能分辨两点之间的最短距离

免疫凝集电镜技术：即采用抗原抗体凝集反应后，再经负染色直接在电镜下观察

样品上致密和较厚的部分对电子的散射角大，被物镜下方设置一个带孔的圆片（即物镜光阑）拦掉，这样通过的电子较少，像的亮度较暗，反之则为亮区。

一般生物医学常用透射电镜

Coils

临床超微病理诊断中的应用

×45000

轴对称分布的电磁场具有能使电子束偏转、聚焦的作用。

人甲状旁腺细胞，胞质内粗面内质网短而多层排列，为内分泌细胞粗面内质网（↑）的特点。;一.透射电镜基本结构;电子照明系统;;电子枪——电子束的发射源。

常用的是发夹形热钨丝三电极式电子枪。灯丝（阴极）由钨丝制成，通电加热后发射电子发射出的电子束受处于负电位的栅极所调制,并被阳极的高电位（几十～几百千伏）区加速后形成一束“光源”,即电子源。

另外还有六硼化镧阴极、点阴极和场发射电子枪等几种高亮度新型电子枪。;聚光镜——一种电磁透镜，由外包铁壳的线圈形成。当线圈中通有电流时，铁壳的缝隙处集中产生磁场，控制电子束的运动。

聚光镜的作用是将电子枪发出的电子流会聚后照射到样品上。;2.电子成像系统

——样品及样品以下的电磁透镜;样品以下的电磁透镜——

物镜、中间镜和投影镜

改变各透镜电流可以在很大范围内改变图像的大小

图像的聚焦是靠调节物镜电流来实现的

物镜是整个仪器中最重要的部分，它决定电镜分辨率

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