HIV抗体检测上岗培训课件.ppt

对筛查结果的解释筛查检测的目的是检出所有的阳性者，因此对筛查试剂的质量要求是敏感性必须好，在注重强调敏感性的情况下，特异性不可避免地受到影响。出现假阴性或假阳性结果，同时还有可能出现的技术误差等等。因此分析筛查结果时，必须全面考虑。筛查实验的阳性结果不能最终确定为HIV抗体阳性，必须做补充试验才能下结论。假阳性结果一些含有针对HLA抗原的抗体患自身免疫性疾病（如系统性红斑狼、风湿病等寄生虫（如疟疾等）其他病毒（如病毒性肝炎等）近期疫苗接种（如流感疫苗接种等）高丙种球蛋白症假阴性结果“窗口期”感染者严重的HIV相关免疫紊乱者血清转换期：一些病人在病程的晚期发生血清学转换，可能由于免疫系统的崩溃所致；也可能于HAART治疗导致免疫重建的病人IgG抗体缺乏者抗原量过量技术误差实验中出现技术误差是难免的，特别是在一次做大批量检测时。血清标本或试剂稀释或配备不正确加样器污染或不正确加错标本临近孔交叉污染洗涤程序错误吸光检测不正确对确证结果的解释WB的检测结果是在转印条膜特异性HIV抗原的位置上出现深浅不同的条带，按照不同的的带型，最终结果可以判断为HIV抗体阳性、HIV抗体阴性、HIV抗体不确定。HIV抗体阳性：说明是真正感染了HIV，为HIV感染者或AIDS。HIV抗体阴性：①未感染HIV②“窗口期”感染者HIV抗体不确定：不仅筛查阳性的标本可以出现不确定的结果，筛查阴性的标本做WB检测时也有大约15%出现不确定结果，可能为下列几种情况。早期感染：有过HIV感染危险行为的个体。处在血清转换的过程，出现P24最多见，2—3个月以后可以显示确切的阳性反应。在WB条带中，P24、P31和P55比单独P17预示早期感染的价值高得多。AIDS病人：在病程的晚期，可能丧失对P24抗原和其他抗原的反应性而表现为持续的不确定结果。非特异性反应：共同抗体的交叉反应，多见于胶原-血管疾病，自身免疫性疾病、恶性肿瘤、高球蛋白血症及其他病原微生物感染等。对不确定结果如何处理2-4周后复检随访或尽快做核算检测试剂盒选择必须使用经国家食品药品监督管理局注册批准、在有效期内的试剂，试剂应从灵敏度，特异性，精密度，稳定性，简便性，安全性及经济性作出全面的评价。推荐使用临床质量评估敏感性和特异性高的方法及试剂。敏感性:是该方法能够检测出最弱阳性标本的能力，

真阳性数敏感度=×100%真阳性数+假阴性数特异性：是该方法能够检测出真阴性标本的能力。真阴性数特异度=×100%真阴性数+假阳性数精密度：ELISA试剂一般指其批内CV，其值应小于15%；定量试剂应同时考察线性范围试剂盒选择稳定性：试剂在规定条件下能储存的时间，一般采用破坏性试验即将试剂存放于37℃保存，定期测定其灵敏度，特异性和精密度等指标，直到其质量指标开始下降为止，通常认为37℃每稳定一天相当于4-10℃保存一个半月。简便性：指在不影响试剂的前三项指标的前题下，实验和测定步骤越少越好，在定性试验中结果判断简单明了，定量试验结果计算也应简单。安全性：指试剂对操作者和环境安全无害无传染性。经济性：试剂在同等质量条件下通过大规模生产或技术进步降低成本而市场价格比较合理。通过询问试剂包被物的组成，如原料来源（基因工程或合成多肽），片段的组合（按比例混合或化学合成），片段的长短等判断试剂的优劣；试剂评价需要有权威的血清考核盘（Panel）进行检测，由于Panel一般实验室不易取得，每进行一次试剂评价也很麻烦。可以通过间接的信息对试剂进行选择。根据权威部门发布的试剂评价结果，了解市场上试剂的质量优劣。如参考中国CDCAIDS参比实验室组织的《全国HIV抗体诊断试剂临床质量评估》结果对试剂进行选择。检测技术全国艾滋病检测技术规范（2015年修订版）谢谢********明胶颗粒凝集试验（PA）：是HIV抗体检测的一种简便方法。将HIV抗原致敏的明胶颗粒，与待检样品作用。当待检样品含有HIV抗体时，明胶颗粒与抗体发生凝集反应，根据凝集情况判读结果。PA试剂有两种:同时检测HIV-1和HIV-2抗体以及分别检测HIV-1和HIV-2抗体。有效试验的阴性和阳性对照质控，需符合试剂盒的规定。凝集试验与ELISA的原理比较ELISAColor凝集试验