《细粒棘球绦虫快速检测方法crispr-cas12a》.pdf

ICS11.220

CCSB41

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西藏自治区地方标准

DB54/TXXXX-XXXX

细粒棘球绦虫快速检测方法crispr-

cas12a

（征求意见稿）

20XX-XX-XX发布20XX-XX-XX实施

西藏自治区市场监督管理局发布

DB54/TXXXX-XXXX

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规

定起草。

本文件由西藏自治区农业农村标准技术委员会提出并归口。

本文件起草单位：西藏自治区农牧科学院畜牧兽医研究所。

本文件主要起草人：唐文强、黄福强、石斌、李鑫、赵霞玲、夏晨阳、单曲拉姆、马弘财、刘增强、

齐婉香、罗润波、孙建春。

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细粒棘球绦虫快速检测方法：CRISPR-Cas12a

1范围

本文件规定了细粒棘球绦虫CRISPR-Cas12a检测的术语和定义、仪器耗材与试剂、操作方法及结果

判定等要求。

本文件适用于实验室对细粒棘球绦虫的快速检测。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，

仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本

文件。

GB19489实验室生物安全通用要求。

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

CRISPR-Cas12a

CRISPR全称为ClusteredRegularlyInterspacedShortPalindromicRepeats，中文翻译为“成

簇的规律间隔短回文重复序列”，是细菌的适应性免疫系统。Cas全称为CRISPRassociated

nuclease，指CRISPR相关核酸酶，Cas12a效应蛋白又称为Cpf1效应蛋白，是一种由可编程RNA引导

的DNA核酸酶，属于Ⅱ类V型CRISPR/Cas系统。

3.2

细粒棘球绦

一种在世界范围内流行的人畜共患慢性寄生虫，属圆叶目（Cyclophyllidea）带科（Taeniidae）棘

球属（Echinococcus）绦虫，可引起囊型棘球蚴病（cysticechinococcosis,CE）。

4仪器材料与试剂

4.1仪器

a)实时荧光恒温扩增仪、金属浴、恒温培养箱等任意一种可以恒温在37℃的仪器；

b)微量移液器（1μL~10μL，20μL~200μL，200μL~1000μL）；

c)掌上离心机：最高转速不小于8000rpm；

d)冷冻式离心机：最高转速不小于15000rpm；

e)涡旋震荡仪；

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f)-80°超低温冰箱；

g)实时荧光恒温扩增仪、荧光定量PCR仪、蓝光照胶仪、验钞灯等任意一种可以实时检测荧光信

号或可发出蓝/紫光的仪器设备。

4.2材料

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