抗南方根结线虫生防细菌筛选、鉴定及其防效研究.pdf

摘要

根结线虫病作为最重要的土传病害之一，造成植株地上部的叶片变小、失绿，植

株生长缓慢，最终严重危害作物生产导致产量损失，严重时甚至绝收。由于低毒、环

境友好的要求提出，许多化学药剂被限制使用，而使用生物手段防治根结线虫近年来

受到越来越多的重视，具有较大的发展前景。本研究从根际土壤分离出生防细菌，通

过室内触杀试验及盆栽试验发现三株生防细菌对根结线虫防效较好，并对这三株生防

细菌进行鉴定。此外，通过裂根法初步明确了这三株生防细菌均可诱导番茄抗根结线

虫病。本研究以期为开发出新的生防细菌防治根结线虫提供菌种资源。主要研究结果

如下：

（1）生防细菌的筛选。采用稀释涂布法和平板划线法，从土壤较为肥沃、微生

物较为丰富的样品中分离得到311株细菌，分别来自重庆市、湖南省张家界、黑龙江

省哈尔滨市等地区。以南方根结线虫（Meloidogyneincognita）二龄幼虫为靶标线虫，

采用直接触杀法对土壤分离细菌进行筛选，获得50株对南方根结线虫二龄幼虫校正

死亡率均大于80%的菌株，其中8株具有较稳定的杀线虫活性。

（2）抗南方根结线虫细菌菌株的防效测定。以南方根结线虫二龄幼虫和卵囊为

靶标进行二次筛选，发现H14、L16与GZ5三株对南方根结线虫二龄幼虫和卵囊活

性较高的菌株，其中H14、L16与GZ5对南方根结线虫二龄幼虫的校正死亡率分别

达93.28%、90.55%、91.59%，对南方根结线虫卵囊孵化的相对抑制率分别达85.62%、

80.82%、82.88%。并研究发现随发酵液稀释倍数的增加，杀线虫活性呈逐渐下降趋势，

而随着处理时间的延长，南方根结线虫校正死亡率呈上升趋势。为测定三株高效生防

细菌的广谱杀虫活性，以大豆胞囊线虫（Heteroderaglycines）、松材线虫

（Bursaphelenchusxylophilus）、水稻干尖线虫（Aphelenchoidesbesseyi）、秀丽隐杆线

虫（Caenorhabditiselegans）为靶标线虫，发现GZ5、H14、L16对四种线虫的杀线虫

活性均显著高于对照，其中综合防治效果最好的为L16。

（3）三株高效杀线虫生防细菌的鉴定。通过形态观察、革兰氏染色、生理生化

测定结合16SrDNA序列系统发育分析，明确GZ5为沃氏葡萄球菌（Staphylococcus

warneri），H14为巨大普里斯特氏菌（Priestiamegaterium），L16为花椒芽孢杆菌

（Bacilluszanthoxyli）。并经过调查发现沃氏葡萄球菌、巨大普里斯特氏菌以及花椒芽

孢杆菌对南方根结线虫防治均未报道。

（4）三株高效生防细菌对根结线虫温室防效及番茄生长影响。盆栽试验结果表

明，菌株GZ5、H14、L16对番茄植株生长有明显促进作用，对番茄上根结、卵囊具

有明显抑制作用，其中菌株GZ5发酵液处理后效果最好，根结和卵囊下降率分别为

63.64%和65%。

裂根试验结果表明三株生防细菌均可以通过对番茄植株产生系统抗性，从而减少

根结线虫的发生。在12d，生防细菌可显著抑制应答根系中的南方根结线虫二龄幼虫

发育成三龄幼虫，菌株H14效果最好，只有18.99%的二龄幼虫发育成三龄幼虫；在

24d，生防细菌可显著抑制应答根系中的南方根结线虫三龄幼虫发育成四龄幼虫，菌

株H14效果最好，四龄幼虫的百分比仅为47.20%。三株高效生防菌在不同程度上均

表现出抑制应答根系中南方根结线虫的发育，表明生防菌可以通过诱导植物产生系统

抗性，从而达到防治根结线虫病的目的，但其中具体作用机理还需要进一步研究。

关键词：番茄南方根结线虫生物防治诱导抗性

Abstract

Root-knotnematodediseaseisoneofthemostimportantsoil-bornediseases.Itcaused

theleavesoftheabovegroundpartoftheplanttobecomesmallerandlosegreen,andthe

plantgrewslowly.Finally,itseriouslyendange