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真菌的直接检查;
1.标本的采集
浅部真菌的标本有毛发、皮屑、甲屑、痂皮;深部真菌的标本可根据情况取痰、尿液、粪便、脓液、多种分泌物、血液、活检组织等;头癣可用拔毛镊子拔取脆而无光泽或带有白色菌鞘的病损部毛发;手足癣及体股癣宜用外科圆头钝刀轻轻刮取损害部边缘或指(趾)间皮屑,花斑癣刮取褐色的皱纹皮屑;甲癣可用小刀刮取病损指(趾)甲深层碎屑。皮肤及指甲病损部位,若先经1∶10000苯扎溴铵(新洁尔灭)洗涤后再刮取标本更好。注意取到足够量的标本,同时为防止标本污染,尽量无菌操作。;
2.标本片制备
取标本少许于载玻片上,加1滴10%氢氧化钾溶液,覆盖一盖玻片,置火焰上微微加热(加速角质溶化,使标本透明),待标本溶解,轻轻加压使成薄片,驱去气泡,用滤纸吸去周围溢液。毛发标本勿加热及加压过甚,以保持其原形,利于鉴别。亦可使用真菌染色法:取洁净的载玻片,加染液(结晶酚20g,乳酸20ml,甘油40ml,蒸馏水20ml,加温溶解后,加入棉蓝0.05g混匀即成)1滴,然后取培养物或标本少许于其中,用接种针将其推匀,加盖玻片,微微加温并稍压盖玻片除去气泡后镜检;结果真菌呈蓝色。;
3.显微镜检查
一般先用低倍镜检查,检查有无真菌菌丝或孢子,然后用高倍镜观察菌丝和孢子的特征。皮屑及甲屑阳性标本常可查见分支菌丝。毛发标本若为小孢子菌属感染,可见毛发外围有许多圆形小孢子,以镶嵌状排列;毛癣菌属紫色癣菌或断发癣菌感染,常可见发内有多量呈链状排列的孢子;黄癣感染,则发内常有不规则菌丝及空泡,花斑癣菌可见香蕉形短粗菌丝及成群孢子。;
4.注意事项
(1)检查真菌及孢子时,应注意与各种假菌丝,如纤维、表皮细胞间隙及气泡、油点等的鉴别。
(2)镜检找到菌丝或孢子,常可确立癣症的诊断,但1次检查阴性结果,不能完全排除,有时须做多次检查。
(3)取材前皮损最好不要涂药。
(4)除少数菌种外,大部分真菌仅根据镜下形态不能确定菌种,必要时可做进一步培养。
(5)采集标本应注意无菌操作。;
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