高二生物微生物的实验室培养说课稿公开课一等奖课件省赛课获奖课件.pptx

微生物实验室培养的基本操作程序;四、实验操作;四、实验操作;1．计算、称量

2．溶化

3．调pH：pH7．6

4．过滤：这一步能够省去。

5．分装：分装过程中注意不要使培养基沾在管口或瓶口上，以免沾污棉塞而引发污染。分装三角烧瓶的量以不超出三角烧瓶容积的二分之一为宜。

6．加塞

7．包扎;8．灭菌:

将50ml培养基用玻棒转移至三角锥瓶中，塞上棉花塞，包上牛皮纸，再放入高压蒸气灭菌锅，在压力为100kPa、温度为121℃，灭菌15～30min。将培养基用旧报纸包裹，放入干热灭菌箱内，在160～170℃下灭菌2h。;倒平板技术;倒平板技术;倒平板技术;倒平板技术;9．倒平板:

待培养基冷却到50℃左右时，在酒精灯附近倒平板。（倒平板操作见课本）2d后观察平板，无杂菌污染才可用来接种.

10．无菌检查：

将灭菌的培养基放入37℃的温室中培养24—48小时，以检查灭菌与否彻底。;实验操作录像;1.培养基灭菌后，需要冷却到50℃左右时，才干用来倒平板。你用什么方法来预计培养基的温度？;1.培养基灭菌后，需要冷却到50℃左右时，才干用来倒平板。你用什么方法来预计培养基的温度？;2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？;2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？;3.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？;3.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？;4.在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？;4.在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？;（二）纯化大肠杆菌;平板划线的操作办法;;;;;;;;;一旦划破，会造成划线不均匀，难以达成分离单菌落的目的；

二是存留在划破处的单个细胞无法形成规矩的菌落，菌落会沿着划破处生长，会形成一种条状的菌落。;;实验操作录像;;答：第一步灼烧是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物；每次划线前灼烧是为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次???线时菌种的数目逐步减少，方便得到菌落。划线结束后灼烧，能及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。;2.在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？;2.在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？;3.在作第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线？;3.在作第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线？;稀释涂布平板法;1.将分别盛有9mL水的6支试管灭菌，并按101~106的次序编号。;2.用移液管吸取1mL培养的菌液，注入第二支试管中。用手指轻压移液管上的橡皮头，吹吸三次，使菌液与水充足混匀。;3.从101倍稀释的试管中吸取1mL稀释液，注入102倍稀释的试管中，重复第2步的操作。依次类推，直到完毕最后一支试管的稀释。;注意：

移液管需要通过灭菌。操作时，试管口和移液管离火焰1~2cm处.;涂布平板的全部操作都应在火焰附近进行。结合平板划线与系列稀释的无菌操作规定，想一想，第2步应如何进行无菌操作？;涂布平板的全部操作都应在火焰附近进行。结合平板划线与系列稀释的无菌操作规定，想一想，第2步应如何进行无菌操作？;微生物的恒温培养;微生物的恒温培养;菌种的保存;四、课题成果评价;（二）接种操作与否符合无菌规定

如果培养基上生长的菌落的颜色、形状、大小基本一致，并符合大肠杆菌菌落的特点，则阐明接种操作是符合规定的；如果培养基上出现了其它菌落，则阐明接种过程中，无菌操作尚未达成规定，需要分析因素，再次练习。;（三）与否进行了及时细致的观察与统计

培养12h与24h后的大肠杆菌菌落的大小会有明显不同，及时观察统计的同窗会发现这一点，并能观察到其它某些细微的变化。这一步的规定重要是培养学生良好的科学态度与习惯。;例1.有关微生物营养物质的叙述中，正

确的()

A.是碳源的物质不可能同时是氮源

B.凡碳源都提供能量

C.除水以外的无机物只提供无机盐

D.无机氮源也能提供能量;例1.有关微生物营养物质的叙述中，正

确的()

A.是碳源的物质不可能同时是氮源

B.凡碳源都提供能量

C.除水以外的无机物只提供无机盐

D.无机氮源也能提供能量;例2.下面