细胞增生和凋亡的分子.ppt

第64页,共77页，星期六，2024年，5月AnnexinV-FITCFluorescencePIFluorescenceTimecourseofapoptosisinTF-1cellsculturedinGM-CSF-freemedium第65页,共77页，星期六，2024年，5月第66页,共77页，星期六，2024年，5月ApoptoticHeLacellswerestainedwithFITC-AnnexinV+PI第67页,共77页，星期六，2024年，5月线粒体膜势能（??mt）的检测

线粒体荧光染料：Rhodamine123、DiOC6（3）、JC-1、TMRM等对线粒体膜电位非常敏感，其荧光的增强或减弱说明线粒体内膜电负性的增高或降低。第68页,共77页，星期六，2024年，5月DNA片段化分析细胞凋亡时主要生物化学特征是其染色质发生浓缩,染色质DNA在核小体单位之间的连接处断裂,形成180?200bp整数倍的寡核苷酸片段,在凝胶电泳上表现为梯形电泳图谱(DNAladder)。第69页,共77页，星期六，2024年，5月第70页,共77页，星期六，2024年，5月第71页,共77页，星期六，2024年，5月第72页,共77页，星期六，2024年，5月第73页,共77页，星期六，2024年，5月第74页,共77页，星期六，2024年，5月第75页,共77页，星期六，2024年，5月第76页,共77页，星期六，2024年，5月*感谢大家观看第77页,共77页，星期六，2024年，5月*****在中期当MPF活性达到最高时，通过一种未知的途径，激活后期蛋白复合体-APC，将遍在蛋白连接在cyclinB上，导致cyclinB被蛋白酶体（proteasome）降解，完成一个细胞周期*G2期的停滞涉及一系列的磷酸化过程第32页,共77页，星期六，2024年，5月转录因子P53能使细胞停滞在G1期及G2期第33页,共77页，星期六，2024年，5月四，生长因子等细胞外因素通过信号转导调控细胞周期细胞从G0期进入细胞周期依赖多种生长因子的协同促进作用第34页,共77页，星期六，2024年，5月G1期的细胞也需要生长因子促进细胞周期的进程第35页,共77页，星期六，2024年，5月第二节细胞凋亡是一种自发的程序化细胞死亡细胞凋亡机制涉及胱天蛋白酶的级联活化死亡受体途径及线粒体途径是两种主要的凋亡信号转导途径第36页,共77页，星期六，2024年，5月细胞死亡分为两大类：1、由各种突发的，意外的事件所致的细胞死亡(病理性死亡)，形态学上表现为细胞坏死(necrosis)。2、程序性细胞死亡，形态学上表现为细胞凋亡(apoptosis)。凋亡是多细胞生物发育及成体中维持体内平衡的一种正常事件第37页,共77页，星期六，2024年，5月例如蝌蚪尾的消失脊椎动物的神经系统的发育发育过程中手和足的成形过程第38页,共77页，星期六，2024年，5月第39页,共77页，星期六，2024年，5月细胞凋亡与细胞坏死的区别—————————————————————————————————————————————————————————坏死凋亡1.性质2.诱导因素强烈刺激，随机发生较弱刺激，非随机发生3.生化特点4.形态变化6.DNA电泳5.炎症反应7.凋亡小体8.基因调控被动过程，无新蛋白合成，不耗能主动过程，有新蛋白合成，耗能细胞结构全面溶解、破坏、细胞肿胀胞膜及细胞器相对完整细胞皱缩，核固缩弥散性降解，电泳呈均一DNA片状DNA片段化(180-200bp)，电泳呈“梯”状条带溶酶体破裂，局部炎症反应溶酶体相对完整，局部无炎症反应有病理性，非特异性生理性或病理性，特异性无有无第40页,共77页，星期六，2024年，5月坏死凋亡第41页,共77页，星期六，2024年，5月确保胚胎发生、器官发育，调节细胞群体维持内环境稳定发挥积极的防御功能凋亡的生理意义凋亡的病理意义器官功能障碍凋亡的意义恶性肿瘤发生第42页,共77页，星期六，2024年，5月二，凋亡途径是由诱导产生的胱天蛋白酶级联反应凋亡途径最早在线虫中被阐明秀丽隐杆线虫（CaenorbabditisElegans)第43页,共77页，星期六，2024年，5月麻省理