实验一血涂片的制作及免疫细胞的形态观察.pdfVIP

实验一血涂片的制作及免疫

细胞的形态观察

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一、实验目的

学习掌握血涂片制备和染色方;

比较观察各种免疫细胞的形态。

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二、实验原理

血涂片是血液学研究中的最根本技术。

将血液样品制成单层细胞的涂片标本。为观

察细胞内部结构，识别各种细胞，血涂片必

须进行染色。血涂片的各种染色方法大多是

罗氏〔Wright〕染色法衍变来的。目前常用

瑞特氏染色法。

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瑞氏染料是由酸性染料伊红和碱性染料亚甲蓝

组成有复合染料。细胞的染色既有物理的吸作用，

又有化学的亲和作用，各种细胞成分化学性质不同，

对各种染料的亲和力也不一样。

因此，经瑞氏染液染色后，不同免疫细胞中的

颗粒可以呈现不同的颜色。根据细胞中颗粒的颜色、

大小及多少，再结合细胞的大小及细胞核的形态，

就可以将免疫细胞进行分类计数。

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三、实验用品

l实验材料：

l酒精棉球、载玻片、眼科镊、眼科剪等。

l试剂：

l瑞氏〔Wright〕染液。

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四、实验步骤

１.准备洁净玻片两张，一张用于推片，另一张用于

固定标本。

２.剪断小鼠尾巴取血或小鼠眼球取血，迅速在玻片

上涂血膜制备血涂片，自然枯燥。

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涂片

将一滴血置于载玻片的一端，再取另一张

边缘光滑的载玻片，斜置于血涂片的前缘，先

向后稍移动触及血滴，使血液沿玻片端展

开成线状，两玻片的角度以30-40度为宜〔角度

过大血膜较厚，角度小那么血膜薄〕，将

载玻片向前推进，即涂成血液薄膜〔如图〕，

推进时速度要一致，否那么血膜成波浪形，厚

薄不匀。

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3．瑞氏染色

待涂片在空气中完全枯燥后，滴加数滴瑞氏

染液盖满血膜为止，染色1min。

染1分钟后，再加等量的缓冲液或蒸馏水于染

色液上，吹匀,浸染约8-10分钟。

用蒸馏水迅速冲洗。待自然枯燥后或用吸水

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4．观察

分别用低倍、高倍镜观察血涂片，分辨

不同的血细胞类型。

淋巴细胞

颗粒细胞〔嗜酸性、嗜碱性、嗜中性〕

单核细胞精选ppt

五、实验结果

绘图并比较几种免疫细胞的形态特征。

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血涂片

红细胞

血小板

未成熟中性粒细嗜酸性粒细

胞