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实验六、细胞凋亡的诱导及观察
2002年10月7日，瑞典卡罗林斯卡医学院诺贝尔奖评审委员会
将2002年诺贝尔生理学或医学奖授予了悉·布雷内、罗伯特·
霍维茨和约翰·苏尔斯顿三位科学家，以表彰他们在“细胞程序
性死亡〞这一领域中的开创性工作。他们不但发现在生物的
器官发育过程中存在细胞程序性死亡，而且说明了细胞程序
性死亡过程中的基因规律。
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实验目的
•1.了解细胞凋亡的原理
•2.学习离体诱导细胞凋亡的方法
•2.掌握利用普通显微镜和荧光显微镜
观察凋亡细胞形态的方法
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一、细胞死亡〔celldeath〕
•定义：
细胞生命现象不可逆的停止，分为两种
形式，即坏死性死亡和程序性死亡。
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1.坏死性死亡〔necrosis〕
•定义：
细胞外部的化学、物理或者生物的
因素的侵袭而造成的细胞崩溃和裂解，
是被动的死亡。
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2.程序性死亡〔programmed
celldeath,PCD〕
定义：
细胞在一定的生理或者病理条件下按照自身
的程序结束其生存，是细胞接受指令后进行
的主动性死亡，涉及一系列基因的激活、表
达和调控。受内在遗传机制的控制主动结束
生命的过程。
程序性死亡主要包括细胞凋亡〔apoptosis〕
和细胞自噬〔autophage)，
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2.1细胞凋亡〔apoptosis〕
•定义：是由体内外因素触发细胞内预存
的死亡程序而导致的细胞主动死亡过程.
凋亡细胞将被邻近的细胞或吞噬细胞所
吞噬并消化
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2.2细胞凋亡诱导因素
•内源性因素；内源性的因素包括细胞凋
亡诱发机制〔如Ｆas配体、肿瘤坏死因
子等〕的激活和抑制机制〔生长因子、
激素、受体因子等增殖性因子〕的失活。
•外源性的因素；外源性的因素包括放射
线、热休克等物理性因素，药物、毒物
等化学性因素以及病毒、细菌等生物学
因素。
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2.3细胞凋亡的生物学特征
•形态学特征
•生物化学特征
•DNA片段化
•大分子的合成
•tTG〔组织转谷氨酰胺酶〕的积累
并到达较高的水平。
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形态学特征
•细胞变圆、胞质皱缩，细胞体积减小，
染色质凝聚，核碎裂成为染色质块〔核
碎片。整个细胞通过发芽、起泡等方
式产生一些球形突起，并在基部脱落形
成大小不等的、内含胞质、细胞器和核
碎片的凋亡小体〔apoptoticbody〕。
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细胞凋亡过程的3个阶段
凋亡的起始：
细胞外表的特化结构如微绒毛消失，细胞间接触的消
失，但细胞膜依然完整；线粒体大体完整，但核糖体
逐渐从内质网上脱离，内质网囊腔膨胀，并逐渐与质
膜融合；染色质固缩，形成新月形帽状结构等形态，
沿着核膜分布
凋亡小体的形成:
核染色质断裂为大小不等的片段，与某些细胞器如线
粒体一起聚集，为反折的细胞质膜所包围。细胞外表
产生了许多泡状或芽状突起，逐渐形成单个的凋亡小
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坏死凋亡
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