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实验５蚕豆根尖细胞微核检测技术

一原理微核(Micronucleus,MCN)，也叫卫星核，是真核生物

细胞中的一种异常结构，是染色体畸变在间期细胞中的

一种表现形式。微核是各种理化因子，如辐射，化学药

剂对分裂细胞作用产生的。在细胞间期，微核呈圆形或

椭圆形，游离于主核之外，大小应在主核1/3以下。其折

光率及细胞化学反响性质与主核一样，也具有合成DNA的

能力。

一般认为微核是有丝分裂后期丧失着丝粒的染色体断

片产生的。这些断片或染色体在分裂过程中行动滞后，

在分裂末期不能进入主核，便形成了主核之外的核块。

二目的当子细胞进入下一次分裂间期时，它们便浓缩成主核之

外的小核，即形成了微核。微核率的多少与和作用因子

学习蚕豆根尖细胞微核制片与检测技术，了解该技术在诱变作

的剂量或辐射累积效应有正相关。

用检测上的应用。

微核测试用于辐射损伤、辐射保护、化学诱变剂、新

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药试验、食品添加剂的平安评价，以及染色体遗传疾病

三材料

蚕豆根尖〔新鲜的固定材料

四步骤

1蚕豆浸种催芽

2待测液对根尖的处理

3根尖细胞的恢复培养

4根尖的固定

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5根尖的酸水解：将固定的幼根放入青霉素瓶中，用dH2O浸洗2

次，除去水后参加5NHCL将幼根泡住，放入30OC水浴中水解28min

左右〔水解时间与水温有反相关关系〕，待幼根软化〔同时变为半

透明〕即可取出，用dH2O浸洗幼根2次，5min/次。

6制片：将幼根放在擦净的载片上，用解剖针截下4mm左右的根尖

局部，捣碎，参加1-2滴改进苯酚品红染色液，染色10分钟左右，

然后加盖片，压片。

7镜检：先在低倍镜下找出具微核的细胞，再转入高倍镜进行仔细

观察。

五作业

绘出一个具微核的蚕豆根尖细胞图。

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附微核识别标准：

1、但凡主核大小的1/3以下，并与主核别离的

小核；

2、小核着色与主核相当或稍浅；

3、小核形态可为圆形，椭圆形，不规那么形等。

凡符合以上3条的小核就是微核〔

micronucleus,MN)

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微核形成机制：

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附：实验数据的处理和污染程度的划分

将微核观察记录于表上

片号镜检日期镜检者

各次观察的

细胞数与微

核数

微核数/细胞

数

总计

微核千分率

（MN%o)平

均值

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1〕各测试样品〔包括对照组〕微核千分率〔MN‰)的计算为：

MN‰=某测试样点〔或对照〕观察到的微核数/某测试样点〔或对照

〕观察的细胞数〕

MN‰在10‰以下的为根本污染

10‰-18‰区间为轻度污染

18‰-30‰区间为中度污染

30‰以上为严重污染

注：每个处理观察3个根尖，每个根尖记数1000个细胞，统计其中

含微核的细胞数然后平均，即为该处理的微核千分率。

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2〕污染指数〔pollutionindex)

污