生物化学-丝氨酸蛋白酶水解机制课件.ppt

蛋白水解酶分为;酶活化中心的必需基团;活性Ser;DIFP能使乙酰胆碱酯酶（一种丝氨酸蛋白水解酶）失活。乙酰胆碱酯酶的作用是使乙酰胆碱水解成乙酸和胆碱。

乙酰胆碱是一种神经传导物质，本身具有很高的毒性，完成传递任务后必须立即被水解成无毒的乙酸和胆碱。DIFP的存在，使乙酰胆碱酯酶不可逆失活，导致乙酰胆碱在生物体内累积，引起中毒死亡。

具有类似DIFB的化合物还包括一些著名的有机磷杀虫剂，如对硫磷、马来硫磷(结构式书p112);丝氨酸蛋白酶的空间结构;丝氨酸蛋白水解酶催化作用机制;反应的第一步：

酶中“催化三元区”的Ser-195羟基对底物肽键的酰基亲核进攻，形成一个包括Ser-195的羟基、底物酰基、氨基在内的共价四面体中间体。

;反应的第二步：

四面体的中间物分解形成另一个中间物，并伴随C-N键的断裂。肽键断裂后，R1NH2从酶中离去，其位置被水溶液中的水分子取代。;反应的第三步：

酰基-酶中间体的解离，His作为广义酸起催化作用;胰凝乳蛋白酶、胰蛋白酶、弹性蛋白酶的结构与它们的水解选择性;4.5酶的抑制作用和抑制剂;抑制剂的特点;抑制剂的作用方式;不可逆抑制作用;生物化学-丝氨酸蛋白酶水解机制;一些重要的抑制剂及其实际意义;金属酶抑制剂;可逆抑制的分类;可逆抑制;例:丙二酸对琥珀酸脱氢酶的抑制作用;非竞争性抑制作用（noncompetitiveinhibition）;可逆抑制作用的动力学特征;竞争性抑制作用动力学方程的推导;竞争性抑制作用动力学方程的讨论;C、取方程的倒数，进行双倒数作图;非竞争性抑制作用动力学公式推导;非竞争性抑制作用动力学方程讨论;C、取方程倒数，进行双倒数作图;作业;思考题;3．若以某酶的米氏方程的双倒数作图法得直线1/V=(Km/Vmax)·(1/[S])+1/Vmax在X轴上的截距为-3，Y轴上的截距为2，那么，该酶的Km值是：（）

A．-0.25B．-0.50C．＋0.25D．十0.33

4.具有绝对专一性的酶是：（）

A．酯酶B．胰蛋白酶C．脲酶D．过氧化氢酶

5.下列属于不可逆抑制剂的是。（）

A．丙二酸B．戊二酸C.二异丙基氟磷酸D．亮氨酸

6.结合酶类的特点是：（）

A．辅酶种类很多，酶蛋白种类少

B．一种酶蛋白可以与多种辅酶结合

C．酶蛋白与辅酶组成全酶时才有活性

D．酶蛋白决定催化反应的类型;7．对于侧链带正电荷的氨基酸羧基旁边的肽键具有最强的专一性的酶是：（）

A．羧肽酶B．糜蛋白酶C．胰蛋白酶D．凝乳蛋白酶

8.下列有关Km的正确叙述是：（）

A．Km是酶的特征性物理常数

B．Km是ES中间复合物的离解常数

C．Km可用来表示酶和底物的亲和力

D．Km大，表示酶和底物的亲和力强

9.在酶蛋白中，可以作为广义酸或碱的功能基团有：（）

A．氨基B．羧基C．咪唑基D．酚基

10.在农业上使用的杀虫剂，绝大多数抑制的酶是：（）

A．顺乌头酸酶B．胆碱酯酶C．精氨酸酶D．乙酰胆碱酯酶;11.从底物（S）转变为产物（P），酶催化此反应时，其发生变化的过程下列表达正确的有：（）

A．S—→P

B．E＋S—→E＋P

C．B＋S—→ES—→E＋P

D．E＋S—→ES—→Ep—→E＋p

12.下列具有载运氢离子或电子的辅酶有：（）

A．NADB．FADC．CoAD．FH4

13.酶的活性部位应处在多肽链的（）

A．一个点上B．一条线上C．一个面上D．一个空间（三维）

;填空题;7．一个酶的活性部位上的基团可分为直接与底物结合的＿＿＿和直接参与催化反应的＿＿＿。

8.米切尔和曼顿根据中间产物理论，提出了底物浓度与反应速度的关系式，称为＿＿＿，该方程为＿＿＿。

9.米氏常数可用＿＿＿来表示，它的涵义是酶促反应速度达到＿＿＿一半时的＿＿＿。

10.对于结合酶来说，酶蛋白的作用是＿＿＿，辅助因子的作用是＿＿＿。

11.酶活力是指＿＿＿。测定酶活力实质上是测定＿＿＿。

12.米氏方程式圆满地表示了＿＿＿和＿＿＿之间的关系。;三、问答题;谢谢聆听！