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ICS65.020.20
B16
DB34
安徽省地方标准
DB34/T2814—2017
玉蜀黍赤霉检疫鉴定方法
DetectionandidentificationofGibberellazeae(Schwein.)Petch
2017-03-30发布2017-04-30实施
安徽省质量技术监督局发布
DB34/T2814—2017
前言
本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。
本标准由安徽省检验检疫科学技术研究院提出。
本标准由安徽省动植物检验检疫标准化技术委员会归口。
本标准主要起草单位:安徽省检验检疫科学技术研究院。
本标准主要起草人:李云飞、陈雪娇、宗凯、孙娟娟、郑海松、姚剑、余晓峰、王满满。
I
DB34/T2814—2017
玉蜀黍赤霉检疫鉴定方法
1范围
本标准规定了玉蜀黍赤霉的检疫鉴定方法。
本标准适用于小麦、玉米、水稻等禾谷类作物中玉蜀黍赤霉的检疫和鉴定。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅所注日期的版本适用于本文
件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
3玉蜀黍赤霉基本信息
学名:Gibberellazeae(Schwein.)Petch
分类地位:真菌界(Fungi),子囊菌门(Ascomycota),粪壳菌纲(Sordariomycetes),肉座菌目
(Hypocreales),丛赤壳科(Nectriaceae),赤霉属(Gibberella)。其无性阶段为禾谷镰刀菌(Fusarium
graminearum)。
传播途径:气流、雨水等是玉蜀黍赤霉病菌近距离传播的主要途径,受侵染的种子及病残体等植物
性材料的调运是远距离传播主要途径。
4方法原理
根据玉蜀黍赤霉在寄主上的为害症状(参见附录A),培养基上生长的菌落、菌丝、分生孢子等形
态特征,以及PCR特异扩增片段大小进行结果判定。
5仪器设备和主要试剂
5.1仪器设备
生物显微镜、体视显微镜、高速冷冻离心机、纯水仪、超净工作台、灭菌锅、制冰机、PCR仪、凝
胶成像系统、电泳仪、培养箱、超低温冰箱、常规冰箱、旋涡振荡器。
5.2主要试剂
5.2.1除另有规定外,所有试剂均为分析纯或生化试剂,实验用水符合GB/T6682的规定。
5.2.21%次氯酸钠。
5.2.3DNA提取试剂:DNA提取试剂盒,CTAB裂解液(20g/LCTAB,0.1mol/LTris,1.4mol/LNacl,
20mmol/LEDTA-Na2),蛋白酶K(20mg/mL),苯酚:氯仿:异戊醇(25:24:1),3mol/LNaAc(pH
5.2),异丙醇,70%乙醇,无菌水。
1
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5.2.4PCR试剂:10×PCRbuffer(含25mmol/LMgCl2),Taq酶,dNTP。
5.2.5凝胶电泳试剂:琼脂糖,TAE,LoadingBuffer,EB。
5.2.6马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA):马铃薯浸
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