沙门氏菌培训资料.pptVIP

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沙门菌属

(Salmonella)沙门氏菌培训资料第1页

介绍沙门氏菌病是公共卫生学上含有主要意义人畜共患病之一。其病原沙门氏菌属肠道细菌科,包含引发食物中毒,造成胃肠炎、伤寒和副伤寒细菌。除可感染人外,还可感染很多动物包含哺乳类、鸟、爬行类、鱼、两栖类及昆虫。沙门氏菌培训资料第2页

特征沙门氏菌革兰氏阴性、两端钝圆短杆菌(比大肠杆菌细)。(0.7~1.5μm)×(2~5μm)散在。无荚膜和芽孢,都含有周身鞭毛(除鸡白痢沙门氏菌、鸡伤寒沙门氏菌外),能运动,大多数含有菌毛,能吸附于宿主细胞表面或凝集豚鼠红细胞。沙门氏菌培训资料第3页

培养特征A需氧及兼性厌氧菌。B在普通琼脂培养基上生长良好,培养24h后,形成中等大小、圆形、表面光滑、无色半透明、边缘整齐菌落,其菌落特征亦与大肠杆菌相同(无粪臭味)。C判别培养基(麦康凯、SS、伊红美蓝):普通无色菌落。D三糖铁琼脂斜面:斜面为红色,底部变黑并产气。沙门氏菌培训资料第4页

生化特征1)发酵葡萄糖,麦芽糖,甘露醇和山梨醇产气。2)不发酵乳糖、蔗糖和侧金盏花醇。3)不产吲哚、V-P反应阴性。4)不水解尿素和对苯丙氨酸不脱氨。伤寒沙门氏菌、鸡伤寒沙门氏菌及一部分鸡白痢沙门氏菌发酵糖不产气,大多数鸡白痢沙门氏菌不发酵麦芽糖。沙门氏菌培训资料第5页

血清学特征沙门氏菌含有复杂抗原结构。普通沙门氏菌含有菌体(O)抗原、鞭毛(H)抗原和表面抗原(Vi荚膜或包膜抗原)三种抗原。沙门氏菌培训资料第6页

传输路径肉污染肉及其制品沙门氏菌检出率美国为20%—25%、英国为9.9%、日本检验进口家禽污染率为10.3%,国内肉类沙门氏菌检出率在1.1%—39.5%。蛋污染蛋及其制品沙门氏菌检出率为3.9%-43.7%,因为吃蛋引发鼠伤寒病病例汇报逐步有增加趋势。环境污染食品在加工、运输、出售过程中往往被沙门氏菌污染。沙门氏菌在粪便、土壤、食品、水中可生存5个月至2年之久。传输问题恢复期患者和无症状带菌者也是常见传染源。沙门氏菌培训资料第7页

沙门氏菌检测标准

—GB4789.4-沙门氏菌培训资料第8页

增菌和选择性培养沙门氏菌培训资料第9页

25g样品225mlBPW36℃8~18h培养1mlBPW增菌液+10mlSCTTB增菌液在42℃、SC增菌液在36℃各培养18~24小时1mlBPW增菌液+10mlTTB分别从TTB和SC增菌液中取1环,接种到BS和HE琼脂上培养BS琼脂在36℃培养40~48小时HE琼脂在36℃培养18~24小时分别从BS和HE琼脂上挑选能够菌落进行TSI初步生化判定沙门氏菌培训资料第10页

可疑菌落判定HE琼脂BS琼脂XLD琼脂科玛嘉显色琼脂阴性科玛嘉显色琼脂阳性沙门氏菌培训资料第11页

生化试验1、先从BS、HE或XLD或显色培养基上挑取可疑菌落。2、接种至TSI,先在斜面上划线,然后再底层穿刺。4、将TSI和NA至于36℃,18~24h培养3.将接种TSI完成接种针不要灭菌,直接在营养琼脂平板上划线。沙门氏菌培训资料第12页

依据上表中可了解为只有在斜面和底层产碱、不产H2S、不产气情况下可不进行生化判定,直接判定为非沙门氏菌,其余任何情况均需进行生化判定。TSI判定沙门氏菌培训资料第13页

三糖铁生化试验底层产H2S底层产酸斜面产碱斜面底层产酸产碱底层产酸斜面产碱底层产H2S产酸产气产酸产气产H2S只在TSI产碱情况下可判定无沙门氏菌,其余任何情况均需进行生化判定沙门氏菌培训资料第14页

生化试验1、准备一只2ml无菌生理盐水试管、酒精灯、接种环、生化判定套装。2、从营养琼脂平板上挑取可疑菌落,接种至生理盐水中,制成0.5个麦氏浊度。3、依次在各个安瓿(bu\)瓶中滴加菌悬液3滴。4、在赖氨酸脱羧酶肉汤及对照和氰化钾及对照中个滴加无菌石蜡覆盖。5.在36℃培养18~24h。沙门氏菌培训资料第15页

菌悬液制备ORO.5个麦氏浊度菌悬液依次在每个安瓿瓶中滴加菌悬液2~3滴。第一步第二步第三步沙门氏菌培训资料第16页

生化试验准备色氨酸肉汤赖氨酸脱羧酶肉汤氨基酸脱羧酶肉汤尿素酶氰化钾培养基 氰化钾培养基对照甘露醇山梨醇β︱半乳糖苷沙门氏菌培训资料第17页

色氨酸肉汤经36℃,18~24h培养后滴加靛基质试剂,片刻观察结果阳性为玫瑰红色。色氨酸脱羧酶及对照和氰化钾及对照转种结束后需滴加液体石蜡覆盖试验管方可进行培养。靛基质试验

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