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Elisa实验药品步骤及相关材料--第1页

本实验室Elisa所需试剂器材

1.试剂

(1)包被缓冲液碳酸盐缓冲液(PH9.60.05M)：

NaCO1.59g

23

NaHCO32.93g

加蒸馏水至1000ml

作用：稀释抗原（菌悬浮液）

(2)洗涤缓冲液PBST(PH7.40.15M)：

KHPO0.2g

24

NaHPO·12HO2.9g

242

NaCl8.0g

KCl0.2g

Tween-200.05％0.5ml

加蒸馏水至1000ml

作用：洗涤

(3)缓冲液PBS(PH7.40.15M)：

KHPO0.2g

24

NaHPO·12HO2.9g

242

NaCl8.0g

KCl0.2g

加蒸馏水至1000ml

作用：制备封闭液

(4)封闭液：牛血清白蛋白(BSA)0.1g，加缓冲液（PBS）至100ml或PBS加2％BSA

作用：封闭空隙

(5)稀释液：PBST加1％牛血清白蛋白(BSA)

作用：稀释抗体及酶标抗体

(5)HRP羊抗兔IgG一酶标抗体

作用：结合抗体

(6)底物缓冲液磷酸盐柠檬酸(PH5.5):

0.2MNaHPO(28.4g/L)25.7ml

24

0.1M柠檬酸(19.2g/L)24.3ml

蒸馏水50ml

作用：制备TMB

(7)TMB(四甲基联苯胺)使用液:

TMB(10mg/5ml无水乙醇)0.5ml

底物缓冲液(PH5.5)10ml

0.75％HO32μl

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作用：显色

(8)终止液(2MHSO）：蒸馏水178.3ml，逐滴加入浓硫酸(98％)21.7ml

24

作用：终止反应

2.器材:

聚苯乙烯塑料板(酶标板)96孔

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抗原制备：

以平板划线法将供试菌菌接种于普通营养琼琼脂培