生物12基因工程的基本操作程序.pptxVIP

当代生物科技专项;目的基因的获取;基因工程的目的基因－－

重要是指编码蛋白质的构造基因。;2、从基因文库中获取;;cDNA(互补DNA)：

是由生物的某一特定器官或特定发育时期细胞内的mRNA经体外反转录后形成的互补DNA片段，与载体连接后储存在一种受体菌群中，这个受体菌群就叫做这种生物的cDNA文库;;根据：目的基因的有关信息。

如：根据基因的核苷酸序列

基因的功效

基因在染色体上的位置

基因的转录产物mRNA

基因翻译产物蛋白质等特性;2、运用PCR技术扩增目的基因;5/;5/;过程：;①概念：PCR全称为_______________，是一项

在生物____复制___________的核酸合成技术;3、人工合成;1）反转录法：;蛋白质;;科学家在哺育抗虫棉时，经历了多次失败，才获得成功。

起初把苏云金芽孢杆菌的抗虫基因插入载体质粒中，然后导入棉花的受精卵中，成果抗虫基因在棉花体内没有体现。

然后在插入抗虫基因的质粒中插入启动子(抗虫基因首端)，导入棉花受精卵，长成的棉花植株还是没有抗虫能力。科学家又在有启动子、抗虫基因的质粒中插入终止子(抗虫基因末端)，导入棉花受精卵，成果成长的植株，有了抗虫能力。;基因体现载体的构建;基因体现载体的构建;;;;基因体现载体的构成：;;;将目的基因导入受体细胞;将目的基因导入受体细胞;农杆菌转化法;合用于

单子叶植物;胚珠;花粉管通道法;将目的基因导入动物细胞

①办法：显微注射法

②程序：;

将目的基因导入微生物细胞

①原核生物特点：繁殖快、单细胞、遗传物质少

②办法：

;1、基因工程中科学家常采用细菌、酵母菌等微生物作为受体细胞，因素是()

A．构造简朴，操作方便

B．繁殖速度快

C．遗传物质含量少、简朴

D．性状稳定,变异少;目的基因的体现和检测;DNA分子杂交;A-;目的基因;

具体做法是：

第一步，将目的基因在大肠杆菌中体现出蛋白质；

第二步，将体现出的蛋白质注射动物进行免疫，产生对应的抗体，并提取出抗体（一抗）；

第三步，从转基因生物中提取蛋白质，走凝胶电泳；

第四步，将凝胶中的蛋白转移到硝酸纤维素膜上；

??第五步，将抗体（一抗）与硝酸纤维素膜上的蛋白杂交，这时抗体（一抗）与目的基因体现的蛋白（抗原）会特异结合。

由于这种抗原—抗体的结合显示不出条带，因此加入一种称为二抗的抗体，它能够与一抗结合，二抗抗体上带有特殊的标记。如果目的基因体现出了蛋白质，则成果为阳性。;个体生物学水平;归纳:基因工程的基本操作程序