《GBT 18639-2023狂犬病诊断技术》最新解读.pptx

《GB/T18639-2023狂犬病诊断技术》最新解读;目录;目录;目录;目录;目录;目录;PART;标准修订背景

随着狂犬病防控技术的不断发展，GB/T18639-2002标准中的部分方法已逐渐显露出局限性，如敏感性不足、检测周期长等问题。因此，国家市场监督管理总局和国家标准化管理委员会组织专家团队，对原标准进行了全面修订，旨在提高狂犬病诊断的准确性和时效性。

标准修订要点

新标准GB/T18639-2023在保留原有有效方法的基础上，引入了多项新技术，包括直接快速免疫组化检测(dRIT)、巢式RT-PCR检测、实时荧光RT-PCR检测以及实时荧光重组酶聚合酶扩增(RT-RPA)检测等。这些新方法的应用，极大地提高了狂犬病诊断的灵敏度和特异性。;标准适用范围

新标准不仅适用于动物检疫和疫病监测，还涵盖了流行病学调查时的狂犬病诊断。其广泛适用性确保了狂犬病防控工作的全面性和有效性。

标准实施意义

GB/T18639-2023标准的实施，对于提高我国狂犬病诊断水平、加强动物疫病防控、保障公共卫生安全具有重要意义。通过采用更先进的诊断技术，可以更快速、更准确地识别狂犬病病例，从而采取及时有效的防控措施，遏制疫情的传播和扩散。;PART;GB/T18639-2023与2002版标准对比;;;强调了样品采集、保存和运输过程中的生物安全措施，防止病毒泄漏和人员感染。;诊断标准和综合判定的完善：;GB/T18639-2023与2002版标准对比;GB/T18639-2023与2002版标准对比;;PART;疫情监测与防控;;PART;临床诊断方法详解;实验室检查;PART;采集步骤：;;;;PART;样品采集时机;样品保存与运输规范;PART;;直接免疫荧光检测(DFA)原理;PART;DFA操作流程与技巧;;质量控制

定期检查染色效果和制片质量，确保结果的准确性和可重复性。;;注意事项

避免主观臆断和误判，必要时可请经验丰富的专业人员复核结果。;DFA技巧与优化：;自动化应用;PART;技术原理

直接快速免疫组化检测(dRIT)是一种基于抗原抗体特异性结合原理的检测方法。该方法利用生物素标记的狂犬病病毒单克隆抗体，与待测样品中的狂犬病毒抗原结合，再通过链霉亲和素-过氧化物酶复合物系统放大信号，最终在光学显微镜下观察结果。

操作流程

dRIT的操作流程包括样品采集、固定???切片、染色及显微镜检查等步骤。首先采集可疑动物的脑组织样品，进行固定处理；然后使用切片机制备组织切片，进行免疫组化染色；最后在光学显微镜下观察狂犬病病毒抗原的存在情况。;优点分析

与传统的免疫荧光实验(FAT)相比，dRIT具有操作简便、成本低廉、结果易于判断等优点。该方法无需昂贵的仪器设备，只需光学显微镜即可观察结果，适合在资源有限地区推广应用。此外，dRIT还具有高灵敏度和高特异性，能够准确诊断狂犬病病毒感染。

应用前景

随着狂犬病疫情在全球范围内的不断蔓延，对快速、准确、廉价的诊断方法的需求日益迫切。dRIT作为一种新型的诊断技术，具有广阔的应用前景。它不仅可以用于实验室诊断，还可以应用于现场快速检测，为狂犬病的防控提供有力支持。未来，随着技术的不断完善和推广应用，dRIT有望在狂犬病诊断领域发挥更大作用。;PART;;;;数据依赖性;PART;;;PART;;;设定适宜的温度条件，确保反转录反应的顺利进行。;巢式RT-PCR检测操作步骤;巢式RT-PCR检测操作步骤;巢式RT-PCR检测操作步骤;第二轮PCR产物即为最终的目标扩增产物。;;巢式RT-PCR检测操作步骤;巢式RT-PCR检测操作步骤;;PART;实时荧光RT-PCR检测技术;实时荧光RT-PCR检测技术;PART;;适用于检测多种狂犬病病毒亚型，如IKOV、WCBV和LLEBV。;;;;;未来发展趋势：;PART;;;高灵敏度与特异性

能检测到极低浓度的靶标核酸，同时有效区分特异性序列，减少假阳性结果。;;;;;PART;RT-RPA检测方法的优势分析;;PART;细胞培养物病毒分离检测基础;细胞培养物病毒分离检测基础;PART;病毒分离与鉴定

细胞培养是狂犬病诊断中的核心环节之一。通过从疑似感染动物的脑组织或其他相关样本中分离狂犬病病毒，并在细胞系中进行培养和扩增，可以实现对病毒的快速、准确鉴定。这种方法不仅提高了诊断的灵敏度和特异性，还有助于了解病毒的生物学特性和变异情况。

替代动物实验

传统上，狂犬病诊断常依赖于小鼠脑内接种病毒分离实验，这种方法不仅耗时长，而且存在伦理问题。细胞培养技术的引入为替代动物实验提供了可能。通过体外细胞培养系统，可以在无动物参与的情况下完成病毒分离和鉴定，从而减少对实验动物的依赖，符合伦理和动物福利的原则。;细胞培养在狂犬病诊断中的作用