原花青素对瘦肉精染毒小鼠精子质量损伤的修复作用.docx

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原花青素对瘦肉精染毒小鼠精子质量损伤的修复作用

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摘要目的探讨原花青素（PC）对瘦肉精（CL）染毒小鼠精子质量损伤的修复作用。方法选择50只SPF级成年雄性小鼠按体重随机分为5组：溶剂对照组、CL染毒组、低、中、高剂量PC保护组。CL染毒组按31.5mg/kg.bw剂量灌胃CL溶液；低、中、高剂量PC保护组在灌胃同剂CL的基础上分别按100、200、400（mg/kg·bw）剂量灌胃PC溶液。除对照组灌胃等体积的蒸馏水外，其它每组均上午灌胃CL、下午灌胃PC，每天1次，实验时间均为6周。实验结束后处死动物，分离双侧睾丸其附睾测定相关指标。结果CL染毒组小鼠睾丸和附睾脏器系数均低于对照组及中、高剂量PC保护组（P0.05）；与对照组比较，CL染毒组小鼠精子数减少，精子的死亡率、畸形率增加（P0.05）；与CL染毒组比较，经中、高剂量PC保护后，小鼠精子数均有增加，精子的死亡率、畸形率均有明显减少（P0.05）；与对照组比较，CL染毒组小鼠睾丸组织SOD活性降低，MDA含量增加(P＜0.05)；与CL染毒组比较，中、高剂量PC保护组小鼠睾丸组织SOD活性提升，MDA含量下降，差异均有统计学意义(P0.05)。结论瘦肉精对小鼠睾丸组织及精子质量其酶有损伤作用；一定剂量的PC对CL损伤的睾丸组织及其精子有修复作用，其作用机制可能与抗氧化损伤有关。

【关键词】原花青素；瘦肉精；雄性小鼠；睾丸；精子；抗氧化

盐酸克伦特罗（CL）是一种人工合成β-肾上腺受体激动剂，因它具有明显的促进生长、提高瘦肉率及减少脂肪的作用，俗称“瘦肉精”[1]。CL曾主要用于治疗哮喘等呼吸系统疾病，后研究发现CL能提高饲料转化率和牲畜的瘦肉率，曾广泛应用于畜牧业。由于CL在体内化学性质与结构稳定，在动物体内吸收快、代谢慢、易残留，人类长期食用含有瘦肉精的肉类会对人体造成各种侵害，如慢性毒性，免疫、发育以及致癌、致畸、致突变等病变[2]。原花青素（PC）是植物中广泛存在的一大类多酚类聚合物的总称。广泛存在于葡萄、苹果、山楂、樱桃等植物中，其中以葡萄籽和皮含量最为丰富[3]。近年来研究发现,PC具有抗氧化、抗炎、抗突变、降低血液胆固醇、减少心脑血管疾病的发生、延缓衰老、并能有效预防肿瘤等多种保健功能[4]。PC作为一种新型、高效的天然食品添加剂在营养、医药、保健等领域的应用越来越受到人们的关注。本研究拟以PC作为保护剂，探讨其对瘦肉精致雄性小鼠精子质量的影响，为阐明PC保护瘦肉精的生殖损伤提供实验证据。

1材料和方法

1.1实验动物

SPF级成年雄性昆明（KM）种小鼠50只，入试体重为20±5克，由长沙市天勤生物技术有限公司提供,实验动物合格证书编号：SCXK(湘)2009-0012。所有小鼠均喂养于专属笼，每组一笼，环境温度24℃左右、湿度60%~70%、12小时光照交替的室内饲养，自由摄食、饮水。

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主要仪器及试剂

电子分析天平（AB204-N型），METTLER公司；光学显微镜（CK40），日本OLYMPUS公司；超低温冰箱（SLT-13V-85型），美国HARRIS公司；玻璃匀浆器（20ml）上海博通经贸有限公司；分光光度计（2100型）尤尼柯仪器有限公司。原花青素（PC），纯度＞95%，购于南京泽朗医药科技有限公司；瘦肉精（CL），纯度＞99.9%，购于上海赫澎（上海）生物科技有限公司；SOD试剂盒、MDA试剂盒，购于南京建成生物工程研究所.

1.3实验方法

选择50只SPF级成年雄性小鼠按体重随机分为5组（每组10只）：溶剂对照组、CL染毒组、低、中、高剂量PC保护组。CL染毒组按31.5mg/kg.bw剂量灌胃CL溶液；低、中、高剂量PC保护组在灌胃同剂CL的基础上分别按100、200、400（mg/kg·bw）剂量灌胃PC溶液。上述各组灌胃溶液均用蒸馏水作溶剂,灌胃体积为10ml/kg·bw，除对照组灌胃等体积的蒸馏水外，其它每组均上午灌胃CL、下午灌胃PC，每天1次，实验时间均为6周。末次灌胃24h后摘眼球采血，麻醉后处死小鼠,，分离双侧睾丸、附睾，称重计算脏器系数；取新鲜附睾尾制成精子悬液观察精子数量、活动度及形态学的改变；取睾丸实质部分制备组织匀浆液,按试剂盒说明操作分别测定超氧化物歧化酶活性(SOD)和丙二醛(MDA)的含量。

1.4统计学分析

实验数据采用SPSS16.0统计软件进行处理，方差齐性时采用单因素方差分析，组间比较采用单因素方差分析（ANOVA）法；数据用均数±标准差（?x±s）表示，以P﹤0.05为差异有显著性。

2结果

2.1原花青素对瘦肉精染毒小鼠睾丸附睾脏器系数的影响

表1所示，实验期间瘦肉精染毒