组化和免疫组染化色结果定量测定.pptVIP

第十四章.组化和免疫组化染色结果的定量测定

(TheQuantitationAssayofHistochemistry

ImmunohistochemistryStaining)

将组化,免疫组化和原位杂交等的染色结果

(Techniqueofflowcytometry,FCM)和激光扫描共聚

焦显微镜术(Techniqueoflaserscanningconfocal

microscopy,LSCM)等.;a.显微镜:获取染色结果的光学信息.

为256级可发现染色深浅的微小差别.彩色有两种:真彩色

color)是指将不同灰度转换成不同的颜色以增强对比度.

d.输出装置:显示器或打印机等给出图象表面几何形状测量;

结构的三维图像重建;

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?Copyright2004-2011AsposePtyLtd.;?Evaluationonly.

周变2S白1平A与P其t应L的t照组

附睾:ELV2周和4周组SPAG11E蛋白的表达均较同期对照组显著减弱

(P0.05或P0.01),ELV4周组附睾SPAG11E蛋白的表达较ELV2周组

显著减弱(P0.01).;核酸,蛋白质,脂类,酶类或其它化学成分的光吸收

B.主要结构和工作原理:

激发荧光的理想光源,疝灯的辐射光谱在2501100nm间.

2.单色器和滤光片:保证进入显微镜的光波亮度充足,;1.标本制备:凡是显示细胞内化学物质的各种组化和免疫

组化染色标本均可用显微分光光度计对单个细胞进行定量

测定,但标本内不能有双重染色且染色要保持均匀一致.

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?Copyright2004-2011AsposePtyLtd.;a.单波长法:用一种波长的光测量,所测物质分布如果是

均匀的,因此测量法所得数值,其误差就小.

b.扫描测量法:能够消除由于吸光物质分布不均匀而造成的

分布误差,和由于面积不规则造成的面积测量误差.扫描法

相加.

光,荧光或免疫荧光标记)的都可以应用荧光光度法测定.

广泛用于测定细胞内的核酸(DNA和RNA),氨基酸,蛋白质,;也可测定核与细胞的比例,蛋白质和免疫标记的其它参量.

B.主要结构和工作原理:

1.液流系统:vl荧荧ut等等in色oy胞悬液,放入样品atedt,hA使so在在s.is进fNT;;.i满t鞘Pf在Cyg2021Ao由e流Py室L嘴喷出,

2.激发光器件:在测量区内发射波长可调的激光柱,垂直

照射细胞液柱,细胞受激光照射后发生散射光和荧光.;

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?Copyright2004-2011AsposePtyLtd.;的双螺旋;神光霉素与G-C有特异性;Hoechst33258与

A-T有特异性;吖啶橙(Acridineorange,AO)可以同时

2.细胞核:DAPI(4,6-二脒基-2-苯基吲哚)是专与

4.外周T,B和单核细胞以及T细胞的亚群分选:结合;1.肿瘤学(Oncology):绝大多数肿瘤从空间与时间上都显

示出稳定的多倍体DNA含量,而且常常是非整倍体数.

FCM能诊断异常的DNA干系,可作为指导肿瘤的治疗,了

解病情发展,判断预后和肿瘤治疗药物筛选等的有力证

据.?Evaluationonly.

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