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细胞生物学实验报告(精选3篇)
细胞生物学试验报告(精选3篇)
细胞生物学试验报告篇1
一、试验目的:
1、把握显示细胞中过氧化物酶反应的原理和方法。2.了解细胞凋亡的生物学意义
3、把握凋亡细胞的形态学检测方法
二、试验原理:
1、细胞内的过氧化物酶能把很多胺类氧化为有色化合物,用联苯胺处理标本,细胞内的过氧化物酶能把联苯胺氧化为蓝色的联苯胺蓝,进而变为棕色产物,因而可以依据颜色反应来判定过氧化物酶的有无或多少。中间产物蓝色联苯胺是不稳定的,无需酶的参与即可氧化为棕色化合物。
2、细胞凋亡是指细胞在生理或病理条件下,遵循自身的程序,自己结束其生命的过程。它是一个主动的、高度有序的,基因掌握的,一系列酶参加的过程。
3、凋亡细胞形态学特征是:体积变小,细胞质浓缩;细胞核发生染色质分散和聚集于核膜四周(边缘化);细胞膜有小泡状形成;晚期细胞膜内陷形成大小不同的凋亡小体;依据细胞凋亡形态学特征进行显微观看是检测细胞凋亡的一种直观、牢靠的方法。
三、试验步骤:
细胞中过氧化物酶的显示
1、在载片上滴一滴PBS缓冲液;
2、取骨髓细胞:用断颈法处死小鼠,马上剪取后肢,去除肌肉,剥出后肢股骨,剪开股骨一端,用牙签尖的一端插入剪开的小孔中,抠取少许骨髓细胞置滴有PBS的载片上;
3、涂片:用另一玻片将骨髓细胞沿一个方向涂布推开,室温晾干;
4、媒染:在涂片上滴0.5%硫酸铜液,以盖满涂片为宜,处理30秒-1分钟。5、倾去硫酸铜液,直接滴入联苯胺混合液反应6分钟(以盖满涂片为宜)6、清水冲洗,番红复染2min。
7、镜检:清水冲洗,室温晾干,先低倍镜下观看,后换高倍镜下观看(油镜100×)
细胞凋亡的形态学检测与观看吉姆萨染色:
1、取细胞爬片置于小培育皿中(有细胞面朝上)2、生理盐水轻轻漂洗细胞3、95%乙醇固定5min
4、PBS缓冲液洗2次
5、吉姆萨染色液染色5min6、蒸馏水轻轻洗去染液
7、一般光学显微镜下观看。吖啶橙染色:
1、取细胞爬片置于小培育皿中(有细胞面朝上)2、生理盐水轻轻漂洗细胞
3、甲醇:冰醋酸(3:1)固定5min4、PBS缓冲液洗2次每次1min
5、0.01%吖啶橙染色液在避光环境下染色5min6、蒸馏水轻轻洗去染液
6、选用蓝光激发滤片在荧光显微镜下观看。
四、结果与分析:
1、依据随机选择的几个视野的统计,该样品的细胞凋亡率=227/506×100=44.9
Hela细胞凋亡过程中核染色质的形态变化(吖啶橙染色)
五、思索题:
1、细胞凋亡的调控机制
细胞凋亡是一个受基因调控、众多细胞膜受体和胞浆蛋白参加的细胞主动自杀过程,其触发因素多种多样,包括细胞内诱导因子和抑制因子对细胞凋亡的调控。
2、细胞凋亡的特征
凋亡细胞形态学特征是:体积变小,细胞质浓缩;细胞核发生染色质分散和聚集于核膜四周(边缘化);细胞膜有小泡状形成;晚期细胞膜内陷形成大小不同的凋亡小体。
3、讨论细胞凋亡的方法
定性的讨论方法:常规琼脂糖凝胶电泳、脉冲场倒转琼脂糖凝胶电泳、形态学观看(一般光学显微镜、透射电镜、荧光显微镜)
定量或半定量的讨论方法:各种流式细胞仪方法、原位末端标记法、ELISA定量琼脂糖凝胶电泳。
细胞生物学试验报告篇2
一、试验目的:
1、通过对原核和真核各种形态细胞的光学显微镜观看,了解细胞的形态及其显微结构;
2、学习显微测量的方法,对细胞的大小有始终观熟悉。
二、试验材料和仪器:
小白鼠肝细胞切片;鸡血红细胞;蚕豆叶片横切片;
一般光学显微镜;目镜测微尺;镜台测微尺;载玻片;盖玻片。
三、试验步骤:
(一)细胞形态观看
l、动物细胞的观看
(1)人肝细胞切片:在显微镜下认真观看肝细胞的形态构造。
(2)鸡血细胞涂片的观看:观看血细胞的组成;红细胞、白细胞、血小板的形态特点。
2、植物细胞的观看
取蚕豆叶片横切片的观看:留意表皮细胞和叶肉细胞的基本结构。
(二)细胞的大小和测量
1、卸下目镜的上透镜,将目镜测微尺刻度向下装在目镜的焦平面上,再旋上目镜的上透镜。
2、将镜台测微尺刻度向上放在镜台上夹好,使测微尺分度位于视野中央。调焦至能看清镜台测微尺的分度。
3、当心移
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