呼吸道标本的处理课件.pptVIP

呼吸道标本的处理程序王勇

内容简介n上呼吸道标本标准操作程序（SOP）n下呼吸道标本标准操作程序（SOP）n痰标本的规范化操作（草案）

上呼吸道标本处理程序n大部分步骤需要在生物安全柜内接种n细菌性咽炎的实验室诊断n原理n大多数上呼吸道感染是由病毒引起的。细菌性咽炎经常是由化脓性链球菌引起。但重度的会厌炎和喉气管炎则是例外，其一般是由于b型流感嗜血杆菌引起。n标本n从扁桃体和后咽部采集标本的咽拭子n选择性培养基（如表1）n5%羊血琼脂n含抗生素的ThayerMartin琼脂（GC+）和无抗生素的GCO(仅用于淋病奈瑟菌病例)n巧克力琼脂（仅用于会厌炎和喉气管炎病例）n质量控制n培养基使用之前，QC由培养基组负责。

上呼吸道标本处理程序n培养程序n在1/6琼脂表面用力滚动拭子，并划线分离。n在一区用接种针穿刺血平板几次。（图1）n把平板放置在5%CO2培养。

下呼吸道标本的处理n大多数标本需要在安全柜内操作n常规细菌培养n原理n下呼吸道感染包括支气管炎，细支气管炎和肺炎。以上炎症，特别是肺炎，可以引起严重甚至是致命的疾病。虽然病毒，支原体，立克次(氏)体和真菌都可以引起下呼吸道感染，但细菌是主要的病原体，其所占的比例要比上呼吸道感染要高很多。

下呼吸道标本的处理n下呼吸道标本培养的常见病原菌革兰阳性菌革兰阴性菌n金黄色葡萄球菌化脓性链球菌肺炎链球菌脑膜炎奈瑟氏菌流感嗜血杆菌肠杆菌科细菌结核分支杆菌白喉棒状杆菌假丝酵母菌非发酵菌嗜肺军团菌

下呼吸道标本的处理n标本n痰n气管或经气管壁抽吸物n支气管标本n支气管灌洗液，毛刷，活检标本

下呼吸道标本的处理n材料n培养基n5%羊血平板n巧克力平板n中国兰n念珠菌显色培养基n试剂nSputasol（OXOID）

下呼吸道标本的处理n质量控制培养基使用之前，QC由培养基组负责。n操作程序n肉眼观察n记录痰标本的外观并记录在申请单背面。n外观描述及简写如下：n唾液（S）带血（BS）粘液状（M）水样（W）n粘液脓性的（MP）脓痰（P）脓性粘液痰（PM）n拒收“唾液”标本并报告“标本不适合用于进一步处理”“请重留”

下呼吸道标本的处理n显微镜检n用拭子取所有类型标本的脓液部分涂片，（最好在60度热固定涂片2小时），并准备革兰染色n低倍镜下检查涂片（10倍目镜）；定量计数10个视野下鳞状上皮细胞和白细胞平均数。按照表1分级标准记录在工作表上。

低倍镜下细胞计数（10个视野平均数）倍数0偶见1+2+3+上皮细胞×100无无1010-2525WBC×10025/25-7580(或四分之一视野20)

n如果标本要求革兰染色，在100倍目镜下检查病原体并记录在工作表上n对涂片显示上皮细胞占优势，（3+）丢掉标本并报告“涂片显示口腔正常菌群污染”“标本不适合用于进一步处理”“请重留”

培养程序1.水样痰标本直接接种到培养基，并划线分离2.脓性标本（特别是痰）-匀浆化3.Sputasol（OXIDE）的配制4.无菌操作下，取瓶中的液体1.5ml，加入到18.5ml无菌水中。无菌条件下2-8℃至少稳定48小时痰液化的常规操作程序。痰液中加入等体积的稀释后SPUTASOL?旋涡振荡标本20-30s，并置室温15分钟再次旋涡振荡是标本达到进一步液化。准备立即接种标本。用拭子取混悬液到培养基，并划线。???5.支气管灌洗液（BAL）的定量培养6.旋涡振荡BAL并用0.01ml定量接种环接种到平板上。放置在5%CO2培养箱内n

您可能每天面临以下问题的挑战n痰标本分离出4种细菌做哪一种细菌的药敏试验？n数量很多的凝固酶阴性葡萄球菌在痰里分离出来是否要做药敏?

临床微生物实验室规范操作草案

草案分七部分n标本采集和运送的规范条例n培养前标本质量检测规范n标本接种规范条例n细菌鉴定基本流程规范条例n细菌药物敏感试验规范条例n实验室质量控制n细菌报告规范条例等

第一部分标本采集和运送n标本采集和运送是细菌培养成功的最重要的关键!n但由于标本的采集和运送常有护士或医生或病人自己完成，所以也是最不容易做好的事情，而且不知道问题所在之处，由此引发的最主要后果是阳性率下降，这也是临床医生最不能接受的问题，为此建议来一次革命，用输送培养基代替传统的标本的容器。

痰标本的采集和运送条例1.标本采集时间：用抗生素前；晨痰;2.采集方法：n（1）自然咳痰：用清水漱口3次，应包括咽喉部，用力咳出痰，与灭菌容器中或输送培养基中。

痰标本的采集和运送条例n（2）帮助咳痰：不易获得痰的患者可雾化吸入加温的氯化钠（45℃10％氯化钠水溶液）n（3）支气管镜或支气管毛刷：由医生采集，