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脂溶性维生素的测定方法

——科标检测

脂溶性维生素(lipidsolublevitamin)由长的碳氢链或稠环组成的聚戊二烯化

合物。脂溶性维生素包括维生素A、D、E和K，它们都含有环结构和长的、脂

肪族烃链，这四种维生素尽管每一种都至少有一个极性基团，但都高度疏水的。

某些脂溶性维生素是辅酶的前体，而且不用进行化学修饰就可被生物体利用。

青岛科标检测研究院在食品营养成分检测服务具有丰富的经验，可以助广大

食品企业一臂之力，精确地测定食品中的营养成分含量，提供包括微量元素、维

生素、脂肪酸、糖类在内的全面营养成分测试。以下介绍的是维生素A和维生

素D的测定方法：

一、维生素A

维生素A的测定常用的方法有：三氯化锑比色法、紫外分光光度法、荧光

分析法、液相色谱法。

对于三氯化锑比色法适用于样品中含V高的样品，方法简便、快速、结果

A

准确，但是对维生素A含量低的样品，如每克样品中含5～10μg维生素A时，

这时样品由于受其脂溶性物质的干扰，不应用比色法测定。

对于紫外分光光度法不必加显色剂显色，可直接测定维生素A的含量，对

样品中含VA低的也可以测出可信结果，操作简便、快速。

1、维生素A的性质

⑴因有许多不饱和链，故见光易分解；

⑵在缺氧情况下，对热较稳定，对光特别敏感。如测强化奶粉时，速度要快，

一般要求测定时间长短，因为时间长，见光时间长，见光分解，故测出的比出厂

的含量要少；

⑶对碱稳定；

2、测定步骤

⑴样品用有机溶剂萃取脂类

样品可以根据脂肪的测定处理脂肪，即索氏抽提法，采用乙醚作提取剂，也

可用热苯回流方法提取脂类。如果样品中含蛋白质和淀粉多的情况下可采用乙醚

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提取法。

⑵脂类的皂化

脂类有维生素和脂肪这两部分通过皂化（50%KOH、无水C2H3OH、热回流）

把它们分开，得到一部分皂化物和一部分不皂化物。

皂化条件：

（1）CHOH︰脂类=8︰1；

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（2）KOH量=脂量×皂化价（mg）×2.5；

（3）皂化温度与时间：70℃、30分钟

在皂化时可以加入抗氧剂连苯二酚和对苯二酚，防止氧化。

⑶提取：不皂化物和皂化物经水、苯、乙醚萃取可得到不皂化物。

⑷柱层析分离干扰物质

采用柱层析分离干扰物质，如果柱层析把β-胡萝卜素也洗脱下来，那么这

时维生素A与β-胡萝卜素就是一个混合物，还要将它们分离开。如果样品中只

有维生素A而不含β-胡萝卜素时，这时可直接定容。

维生素A与β-胡萝卜素分离：

吸附剂：8分中性AlO和2分碱性AlO混合，装柱

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分离方法：a.用2%丙酮石油醚洗β-胡萝卜素；