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实验报告

实验题目紫外-可见分光光度法检测罗丹明B和纳米金的吸收峰

：

实验原理

1.紫外分光光度法原理：

许多有机化合物在紫外区具有特征的吸收光谱，因此可以用紫外分光光度法

对有机物质进行定性鉴定，结构分析及定量测定。物质的吸收光谱本质上就是物

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质中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波长的光能量，相应地发生了分子

振动能级跃迁和电子能级跃迁的结果。由于各种物质具有各自不同的分子、原子

和不同的分子空间结构，其吸收光能量的情况也就不会相同，因此，每种物质就

有其特有的、固定的吸收光谱曲线，可根据吸收光谱上的某些特征波长处的吸光

度的高低判别或测定该物质的含量。

紫外分光光度法定量测定的依据是比尔定律，即物质在一定浓度的吸光度与

它的吸收介质的厚度呈正比。首先确定化合物的紫外吸收光谱，确定最大吸收波

长。在选定的波长下，做出化合物溶液的工作曲线，根据在相同条件下测得待测

液的吸光度值来确定待测液中化合物的含量。

2．仿体的制备

组织仿体由吸收子、散射子和水溶剂构成。所用水溶剂是实验等级用水（去

离子水），首先配备具有一定含量吸收子和散射子的初始仿体，之后逐步滴定散

射子或者吸收子，由于吸收子和散射子的初始含量以及滴定量精确可控，因此仿

体的光学系数能够通过理论方法求得，进而用于衡量光学参数提取值的精确性。

需要指出的是，滴定过程中，对于任何一种成分的滴定都会造成另一成分浓度的

下降，比如对于吸收子的滴定使仿体吸收子浓度（吸收强度）增强的同时，也会

使散射子（散射强度）浓度下降，反之亦然。

实验内容

1.罗丹明B溶液的配制

配制浓度为0.02mol/L的罗丹明B1溶液：称取0.4790g罗丹明B，加入少量

水溶解，移至50mL容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。此时获得的罗丹明

B溶液浓度为0.02mol/L，为罗丹明B1的标准溶液；

配制浓度为0.005mol/L的罗丹明B2溶液：吸取母液3ml于离心管中，用蒸

馏水进行4倍稀释，摇匀，此为浓度为0.005mol/L罗丹明B2溶液；

配制浓度为0.001mol/L的罗丹明B3溶液：吸取母液1ml于离心管中，用蒸

馏水进行20倍数稀释，摇匀，此为浓度为0.001mol/L罗丹明B3溶液；

配制浓度为0.0005mol/L的罗丹明B4溶液：吸取母液1ml于离心管中，用蒸

馏水进行40倍数稀释，摇匀，此为浓度为0.0005mol/L的罗丹明B4溶液。

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2.纳米金溶液的制备

由老师配制三种纳米金溶液样品1、2、3。

3.开启电脑以及紫外分光光度计主机。

4.用移液枪将罗丹明b溶液从试管中转移至比色皿中，将比色皿放入紫外分

光光度仪中，点start。

5.全波长（从400至900nm）检测罗丹明B溶液的吸光度。

6.测不同形状纳米金溶液的吸光度。

7.将比色皿中的溶液倒尽，然后用蒸馏水或有机溶剂冲洗比色皿至干净，倒立

晾干。

试剂与仪器

罗丹明B、纳米金溶液、移液枪（1000ul）、紫外可见分光光度计、超纯水、

比色皿、烧杯（50ml）、离