分光光度分析法.pptVIP

a、目视比色法用眼睛比较溶液颜色的深浅以确定物质浓度的方法称为目视比色法。特点:设备简单、操作简便；无需单色光；准确度不高。b、分光光度计5.紫外—可见分光光度计仪器基本组成光源单色器样品室检测器显示器a.光源在整个紫外光区或可见光谱区可以发射连续光谱,具有足够的辐射强度、较好的稳定性、较长的使用寿命。可见光区:钨灯作为光源，其辐射波长范围在320～2500nm。紫外区:氢、氘灯。发射185～400nm的连续光谱。b.单色器又称波长控制器,其作用是将光源发射的复合光分解成单色光,并可从中选出一任波长单色光的光学系统。包括狭缝、色散元件和准光装置。色散元件的作用是将复合光分解成单色光,有棱镜或光栅两种。c.样品室样品室放置各种类型的吸收池（比色皿）和相应的池架附件。吸收池主要有石英池和玻璃池两种。e.结果显示记录系统检流计、数字显示、微机进行仪器自动控制和结果处理d.检测器利用光电效应将透过吸收池的光信号变成可测的电信号,常用的有光电池、光电管或光电倍增管。1、显色反应2、显色反应条件的选择3.测量条件的选择6.显色与测量条件的选择1）、显色反应显色反应——使无色或浅色的待测组分转变为有色化合物的反应。显色剂——与待测组分反应形成有色化合物的试剂成为。Fe2++3R?[Fe(3R)]2+（红橙色,?max=510nm）R为邻二氮菲2）显色反应条件的选择a.显色剂用量——选择吸光度最大且基本恒定（曲线变化平坦处）的显色剂用量。b.反应体系的酸度——选择吸光度最大且基本恒定（曲线变化平坦处）所对应的pH范围。c.显色时间与温度d.溶剂一般尽量采用水相测定。****分光光度分析法Spectrophotometry一、实验目的1、了解分光光度法的基本原理，理解何谓吸收曲线。2、掌握朗伯—比尔定律，理解何谓标准（工作）曲线。3、了解显色反应及其影响因素，了解测量条件的选择。掌握光度法测定的条件及方案的拟定方法。4.了解分光光度计的性能、结构及使用方法；二、分光光度法基本原理简介分光光度法（spectrophotometry）是基于物质分子对光的选择性吸收而建立起来的分析方法。按物质吸收光的波长不同,可分为紫外分光光度法、可见分光光度法及红外分光光度法。特点:灵敏度较高，适用于微量组分(1~10?g·L-1)的测定；误差较大，相对误差达到2~5%。电磁波谱:X射线0.1~100nm远紫外光10~200nm近紫外光200~400nm可见光400~760nm近红外光750~2500nm中红外光2500~5000nm远红外光5000~10000nm微波0.1~100cm无线电波1~1000m1.物质的颜色与吸收光的关系日光：紫蓝青绿黄橙红复合光:由各种单色光组成的光。如白光(太阳光)单色光:只具有一种波长的光。要求:??=?2nm。互补色光:如果把两种适当颜色的光按一定的强度比例混合也可以得到白光，这两种光就叫互补色光。物质的颜色是由于物质对不同波长的光具有选择性的吸收作用而产生的。如:CuSO4呈兰色。物质呈现的颜色和吸收的光颜色之间是互补关系。光的互补：蓝??黄日光650~760nm580~600nm450~480nm480~490nm600~650nm500~580nm400~450nm490~500nm互补光2.物质的吸收曲线M+热M+荧光或磷光?E=E2-E1=h?各能级是量子化；选择性吸收;分子结构的复杂性使其对不同波长光的吸收程度不同；M+h??M*基态激发态E1（△E）E2用不同波长的单色光照射,测定吸光度,如果以波长?为横坐标,吸