《微生物基础》课件——1.8涂布分离与划线分离技术.pptxVIP

涂布分离与划线分离技术微生物基础

一、涂布分离

器材展示菌种灭菌培养基固体培养基无菌三角瓶移液枪记号笔

器材展示酒精灯超净工作台废物缸涂布棒酒精消毒棉接种环

涂布平板注意事项计算活菌数检测化学因素对微生物的抑杀效应

（1）涂布前，应保持平板表面干燥无水滴，可预先放在培养箱中干燥；涂布平板注意事项

（2）移液时，试管口和移液管应在离酒精灯火焰1-2cm处吸取样液，缓慢注入平皿中，枪头不要接触任何物体；涂布平板注意事项

（3）涂布器使用前应先用酒精消毒或选择一次性无菌涂布器；涂布平板注意事项

（4）涂布时，酒精灯与平皿保持适当的距离，不要接触平皿边缘；涂布平板注意事项

（5）涂布后，将平板静置10min，如样液不易吸收，可将平板放在培养箱，等样品匀液吸收后翻转平板，倒置培养。涂布平板注意事项

二、划线分离

菌种固体培养基记号笔接种环酒精灯器材展示

待分离菌的菌源区逐级稀释的过渡区第1区第2区第3区第4区关键区四区面积的分配应是4＞3＞2＞1

纯化细菌

四区划线法具体的划线顺序

平板划线注意事项分离出单个目标菌落

平板划线注意事项接种环在第一次划线及每次划线之前都要灼烧灭菌，划线操作结束后仍需要灼烧接种环，或采用一次性无菌接种环；

平板划线注意事项灼烧接种环后，要冷却后才能伸入菌液，以免温度太高杀死菌种；

平板划线注意事项划线时，最后一区域不要和第一区域相连；

平板划线注意事项划线用力要大小适当，防止用力过大将培养基划破。