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[实验一]生物组织中可溶性复原糖、脂肪、蛋白质的鉴定
●沉着说课
1.该实验是本门课程的第一个实验。从此以后形态解剖方面的实验内容减少,而生物化学方面的内容增加。本实验的操作技能的学习为以后该类型实验打好根底,一定要强调标准化操作方法。
2.低高倍镜的使用、徒手切片、临时装片等技能,学生经初三、高一两年的搁置,已显生疏。实验时教师可考虑复习,或通过演示提醒学生,注意标准操作要领。
3.本实验难度并不大,但由于内容较多、实验时间长,必须作周密安排才能完成。如实验中教师应做好学生的分工合作;在做脂肪鉴定中,一个学生做临时装片,另一个学生那么可进行调试显微镜;在完成前两个实验后,一个学生刷试管,清洗玻片和整理显微镜,另一个学生那么可进行后一个实验的操作。这样可缩短实验时间。同时又能培养学生的合作精神。
●教学目标
知识目标
识记:记住鉴定所用材料,懂得选材的要求。
理解:理解实验的目的、原理和方法步骤,进一步归纳出生物组织中可溶性复原糖、脂肪和蛋白质的鉴定原理。
能力目标
1.学会制备生物组织试样,并能按标准化要求操作,独立完成鉴定工作。
2.能正确选取鉴定试剂,并能进行标准化操作。
3.明确观察对象,正确说出鉴定过程中试样的颜色变化,并能用准确的语言解释实验现象,作出结论;填写实验报告册。
4.能熟练使用低倍镜、制作徒手切片、临时装片,了解标准使用高倍镜的方法。
情感目标
培养科学思维能力和科学研究方法。
●重点·落实方案
重点
掌握鉴定生物组织中可溶性复原糖、脂肪、蛋白质的根本方法。
落实方案
教师可事先配制好待测样品,如葡萄液、植物油滴、鸡蛋蛋白稀释液。让学生按要求参加相应试剂,观察颜色变化,从而让学生自己归纳出本实验的简单原理。
●难点·突破策略
难点
实验内容较多,实验时间长,必须周密安排,才能按时完成。
突破策略
学生要分工合作。
●实验原理
1.可溶性复原糖鉴定原理
生物组织中普遍存在的可溶性糖类较多,有葡萄糖、果糖、麦芽糖和蔗糖。前三种糖的分子内都含有游离的具复原性的半缩醛羟基,因此叫做复原糖;蔗糖分子内没有,为非复原糖。实验中所用的斐林试剂,只能鉴定生物组织中可溶性复原糖,而不能鉴定可溶性非复原糖。
斐林试剂为一定浓度的氢氧化钠和硫酸铜配制而成的淡蓝色Cu(OH)2沉淀的悬浊液,葡萄糖溶液在参加斐林试剂后,在加热条件下复原为砖红色的沉淀,而葡萄糖氧化成葡萄糖酸。其反响式为:
CH2OH-〔CHOH〕4-CHO+2Cu〔OH〕2CH2OH-〔CHOH〕4-COOH+Cu2O+2H2O
用斐林试剂鉴定复原糖时,溶液变化过程为:浅蓝色棕色砖红色沉淀
2.脂肪鉴定原理
苏丹Ⅲ、苏丹Ⅳ为一种橙黄色脂肪染色剂,苏丹Ⅲ染液遇脂肪的颜色反响为橘黄色,苏丹Ⅳ染液遇脂肪的颜色反响为红色。
3.蛋白质鉴定原理
将尿素加热,两分子尿素放出一分子氨而缩合成双缩脲。
双缩脲在碱性环境中能和硫酸铜结合成红紫色的络化物。蛋白质分子中含有的肽链与双缩脲结构相似,因此,蛋白质可与双缩脲试剂发生颜色反响。
●材料用具
实验材料:葡萄糖液、苹果组织液,植物油滴,浸泡过的花生种子或新鲜的花生种子,鸡蛋蛋白稀释液,黄豆组织液。
仪器:徒手切片刀,试管架,试管夹,大小烧杯,小量筒,滴管,酒精灯,三脚架,石棉网,火柴,载玻片,盖玻片,毛笔,吸水纸,显微镜。
试剂:斐林试剂,苏丹Ⅲ染液或苏丹Ⅳ染液,双缩脲试剂,体积分数为50%的酒精溶液,蒸馏水。
●实验指导
“生物组织中可溶性复原糖、脂肪、蛋白质的鉴定〞实验,实际上是三个独立的实验。在实验中,如注意以下问题,效果那么更好。
1.在做可溶性复原糖的鉴定实验中,一是选材最好是白色或近于白色的植物组织,这样可以防止材料自身颜色对实验变化颜色的掩盖。经实验比拟,颜色反响的明显程度依次为苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜。二是斐林试剂的甲液和乙液混合均匀前方可使用,切勿将甲液和乙液分别参加组织样液中。
2.在做脂肪的鉴定实验中,切取花生子叶薄片,要求实验技能较高,不妨改成刮取花生子叶泥制作临时装片,易做,效果又好。
3.在做糖和蛋白质的实验时,鉴定之前需要留出一局部样液,以便与鉴定后的样液的颜色做比拟,这样可增强说服力。
●课时安排
1课时
●教学过程
一、操作要点及本卷须知
1.往试管参加试剂时,要使试管稍倾斜,用滴管沿管壁缓慢参加试剂。
2.注意斐林试剂必须混合试剂A和B前方可使用,而双缩脲试剂使用时是先参加试剂A,摇匀后观察颜色变化,再参加试剂B,再观察颜色变化。
3.鉴定可溶性糖,加热试管时,应该用试管夹夹住试管上部,放入盛开水的大烧杯中加热。注意试管底部不接触烧杯底部,同时试管口不要朝向实验者,以免试管内溶液沸腾时冲出试管,造成烫伤。如果试管内溶液过于沸腾,可
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