《微生物基础》课件——革兰氏染色.pptxVIP

革兰氏染色微生物基础

细菌个体微小、结构简单，通常呈透明状态未经染色的细菌在光学显微镜下难以观察和区分

阳性菌阴性菌

阳性菌细胞壁具有较厚(30～40nm)而致密的肽聚糖层，多达20层，占细胞壁成分的60%～90%，它同细胞膜的外层紧密相连。有的革兰氏阳性细菌细胞壁中含有磷壁酸

外膜上含有许多独特的结构，如把外膜与肽聚糖层连接起来的脂蛋白，使营养物被动运输通过膜的膜蛋白，起保护细胞作用的脂多糖(LPS)脂多糖也称为内毒素对哺乳动物有高度毒性

结晶紫初染酒精脱色酒精脱色番红复染

渗透学说0101等电点学说0202化学学说0303

渗透学说

革兰氏阳性菌细胞壁厚(约20～80nm)，结构较简单，主要含肽聚糖和磷壁酸

革兰氏阴性菌细胞壁薄(约10nm)，结构复杂，分外壁层和内壁层外壁层又分三层:最外层是脂多糖，中间是磷脂层，内层是脂蛋白内壁含肽聚糖(含量低，结构松散)，不含磷壁酸。

肽聚糖的化学结构G+G-均含有肽聚糖

肽聚糖的化学结构G+的肽聚糖结构N-乙酰葡萄糖胺和N-乙酰胞壁酸经β-1.4糖苷键连接形成的多糖支架

肽聚糖的化学结构N-乙酰胞壁酸分子连接四肽侧链，肽链之间再由五肽桥或肽链联系起来，组成一个机械性很强的三维空间网状结构，层次多达50层。

肽聚糖的化学结构G-的肽聚糖结构N-乙酰葡萄糖胺和N-乙酰胞壁酸经β-1.4糖苷键连接形成的多糖支架。

肽聚糖的化学结构N-乙酰胞壁酸分子连接四肽侧链，但没有五肽桥，因此是二维平面结构，层次少，仅两层。

结晶紫初染碘液媒染碘与结晶紫的复合物

结晶紫初染和碘液媒染后阳性菌由于细胞壁较厚、脂类含量低，肽聚糖网状结构交联致密。因而在乙醇脱色时，细胞因失水使网孔收缩，结晶紫与碘复合物滞留在壁内，细胞呈紫色。

结晶紫初染和碘液媒染后阴性菌细胞壁薄且类脂含量高、肽聚糖含量低且交联松散。在乙醇脱色时，含脂层迅速溶解，结晶紫与碘复合物很容易从薄而松散的结构中洗脱，再经红色染料复染后，阴性菌就呈红色。

等电点学说

关注不同细菌的等电点差异细菌的等电点在pH为2～5，在中性环境中，菌体带负电，很容易与碱性染料结合(如结晶紫、甲基紫)并且阳性菌的等电点(2～3)通常比阴性菌(4～5)低

弱氧化剂可以降低阳性菌的等电点，使两者等电点差异扩大

初染的结晶紫阳性菌结合力比阴性菌强不易被乙醇洗脱

化学学说

核糖核酸镁盐-蛋白复合物

核糖核酸镁盐-蛋白复合物结晶紫碘液

核糖核酸镁盐-蛋白复合物结晶紫碘液结合物不易被乙醇洗脱

结晶紫碘易被乙醇洗脱