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微生物学实验操作考核试题及评分标准

实验一：

消毒、灭菌、无菌操作及实验室注意事项

步

考核目标及评分细则满分值

骤

一浏览整个实验目的、原理和操作步骤。

选择仪器、药品和培养基：

培养皿（2包），试管、吸管、自动式高压蒸汽灭菌锅、紫外

二线灯、注射器，微孔滤膜（0.22μm），镊子和玻璃涂棒等。10分

蒸馏水、无水乙醇、大肠杆菌菌种培养斜面，牛肉膏蛋白胨培

养基/LB培养基等。

进行实验：

1、采用紫外线灭菌法，插上电源，掌握无菌操作台的按钮各个

功能，进行无菌操作室、无菌操作台灭菌，灭菌30分钟。（10

分）

2、进行培养皿、枪头等包扎，掌握干热灭菌、高压蒸汽灭菌操

作方法。（10分）

3、掌握过滤灭菌的方法，正确使用过滤器、滤膜的操作步骤（吸

三70分

液、安装、过滤）。（10分）

4、无菌操作技术

（1）固体培养基加热溶化。（10分）

（2）70%的酒精擦洗操作台面，无菌操作台倒平板。（10分）

（3）无菌操作台接种大肠杆菌进行四分法划线。（10分）

（4）划线的培养基进行37℃培养。（10分）

根据实验现象得出结论：

五掌握干燥灭菌、高压蒸汽灭菌、紫外灭菌、过滤灭菌的操作方法，10分

观察无菌操作的接种划线的效果，有无单个菌落出现。

实验后整理：

六无菌操作台、无菌操作室进行清理。洗涤仪器并使其归位。保持10分

台面和地面整洁，实验后洗手。

实验二：

培养基制备

步

考核目标及评分细则满分值

骤

一浏览整个实验目的、原理和操作步骤。

实验需要的仪器和药品

试管、三角烧瓶、烧杯、量筒、玻璃棒、天平、自动式高压灭菌

二锅、封口膜、记号笔、皮筋、pH试纸等。10分

牛肉膏蛋白胨培养基、LB培养基、高氏一号培养基、马丁氏培养

基的所需药品。

设计实验步骤：

1、LB培养基制备

操作步骤如称量、调pH、液体分装、加琼脂、封口膜封口，包扎、

标记、灭菌。（10分）

2、牛肉膏蛋白胨培养基制备

操作步骤如称量、调pH、液体分装、加琼脂、封口膜封口，包扎、

标记、灭菌。（20分）

三70分

3、高氏一号培养基制备

操作步骤如称量、调pH、液体分装、加琼脂、封口膜封口，包扎、

标记、灭菌。（20分）

4、马丁氏培养基制备

操作步骤如称量、加入孟加拉红溶液、液体分装、加琼脂、封口

膜封口，包扎、标记、灭菌。（20分）

得出结论：

四掌握四种培养基配制方法，使其成为固体培养基，成无菌状态。10分

实验后整理：

无菌操作台、无菌操作室进行清理。洗涤仪器并使其归位。保持

台面和地面整洁，实验后洗手。

五10分

实验三：

实验室和人体表面微生物的检查

步

考核目标及评分细则满分值

骤

一浏览整个实验目的、原理和