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磁珠别离技术

摘要:磁珠别离技术是一种分子生物学别离技术,它利用其外表修饰的磁性颗粒

对生物分子或细胞的亲和结合而进展别离,能对待别离或待检测的靶标进展高

效富集,是一种方便、快速、回收率高、选择性强的方法。磁珠别离技术在生物

学方面的应用始于20世纪70年代后期,目前已经在分子生物学、细胞学、免疫

学、微生物学、生物化学等领域取得一些令人瞩目的研究成果。

根本概念

磁珠磁珠是一种通过一定方法将磁性无机粒子与有机高分子结合形成的具有一

定磁性及特殊构造的体积在几纳米到几十微米之间的载体微球。载体微球的核心

属小颗粒,常为铁的氧化物或铁的硫化物,核心外包裹一层高分子材料,最

外层是功能基团,载体微球外表可根据需要赋予不同的功能基团(如－OH、－

COOH、－CHO、－NH2,—SH、—CONO2、—CONH2、—SO3H、—SiH3、—

环氧基、—CHCl等)，使其表现具有疏水-亲水、非极性-极性、带正电荷-带负电

荷等不同物理性质。同时具有磁响应性，在外磁场作用下具有磁导向性。由于载

体微球表现的物理性质不同,可结合不同的免疫配基,如抗体、抗原、DNA、RNA

等。

应用于磁别离技术的磁性载体微球应具备以下特点:粒径比拟小,比外表积

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较大,具有较大的吸附容量;物理和化学性能稳定,具有较高的机械强度,使用

寿命长;具有可活化的反响基团,以用于亲和配基的固定化;粒径均一,能形成

单分散体系;悬浮性好,便于反响的有效进展。载体微球有纳米级、微粒级的,纳

米级的载体微球与微粒级的载体微球相比具有以下优点:尺寸小,扩散速度快,

悬浮稳定性好;比外表积大,偶联容量大;超顺磁性,能快速实现磁性粒子的分

散与回收。

磁珠的制备方法：共沉淀法、悬浮聚合法、乳液聚合法、分散聚合法、包埋

法及原子转移自由基聚合法等。

免疫磁珠免疫磁珠(Immunomagneticbead,IMB)简称磁珠,免疫磁珠由载体微球和

免疫配基结合而成。免疫磁珠的大小和形状的均一性,可使靶细胞迅速和有效地

结合到磁珠上;它的球形构造可消除与不规那么形状粒子有关的非特异性结合;

超顺磁性可使磁珠置于磁场时,显示其磁性,从磁场移出时,磁性消除,磁珠分

散;保护性壳可防止金属颗粒漏出。

将磁珠按磁珠功能基结合的蛋白质不同分为:包被一抗的磁珠、包被二抗的

磁珠、未包被的磁珠和包被抗生物素的磁珠。并针对不同抗原制出包被相应抗体

的试剂盒,方便了使用。

免疫磁珠的主要特点有:别离速度快、效率高、可重复性好;操作简单、不

需要昂贵的仪器设备;不影响被别离细胞或其它生物材料的生物学性状和功能

免疫磁珠标记方法1直接磁珠和直接标记法：通过物理吸附和共价键结合直接

将特意性抗体与磁珠耦合，然后再与相应细胞结合，形成细胞-抗原-抗体-磁珠复

合物，在外磁场下直接别离目的细胞。快速、简单、特异性和细胞得率高，灵敏

度低，需制备相应的偶联抗体磁珠。2间接磁珠和间接标记法：使用anti-lg等与

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