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实验五细菌生理生化反应--第1页
细菌鉴定中常用的生理生化反应
生05边晔2010030026
周四班同组成员：徐竞
实验时间2012年11月15日
一、实验目的
1.了解细菌生理生化反应原理，掌握细菌鉴定中常用的生理生化反应的测定方法；
2.通过不同细菌对不同含碳、含氮化合物的分解利用情况，了解细菌碳、氮代谢类型
的多样性；
3.了解细菌在培养基中的生长现象及其代谢产物在鉴别细菌中的意义；
4.学习各种接种技术。
二、实验原理
1.各种细菌所具有的酶系统不尽相同，对营养基质分解能力也不一样，因而代谢的产
物存在差别。
2.细菌的这种代谢特点可供鉴别细菌之用。（具体原理略）
3.用生理生化试验的方法检测细菌对各种基质的代谢作用及其代谢产物，从而鉴别细
菌的种属，称之为细菌的生理生化反应。
三、实验器材
1.仪器和用具
恒温培养箱。试管：每个试验4根试管(3根接种，1根对照)。
接种环、接种针、酒精灯、试管架、记号笔、打火机、杜氏小管。
2.微生物
大肠杆菌（Escherichiacoli）、变形杆菌（Proteusvulgaris）、枯草杆菌（Bacillussubtilis）、
产气杆菌（Enterobacteraerogenes）和未知菌S3的各自悬液。
3.试剂
甲基红试剂、V.P.试剂、吲哚试剂。
上次配制的试管培养基（葡萄糖/乳糖发酵培养基，葡萄糖蛋白胨水培养基，胰蛋白
胨水培养基，硫化氢试验培养基，明胶液化培养基，柠檬酸盐培养基），淀粉培养基
平板。
四、实验步骤
1.培养基配制（上次实验制备）
1)葡萄糖/乳糖发酵培养基（用于糖发酵实验）
胰蛋白胨5g
NaCl2.5g
水500ml
制法：
a)将上述成分混合于水中溶解，矫正pH至7.4—7.6。
实验五细菌生理生化反应--第1页
实验五细菌生理生化反应--第2页
b)加葡萄糖/乳糖5g，溶解后加入0.5ml的1.6%溴甲酚紫乙醇溶液，混匀。
c)分装于60支试管内，每管5ml。
d)每管倒置一个杜氏小管，加盖，115℃灭菌30min。
2)葡萄糖蛋白胨水培养基（用于甲基红和VP实验）
蛋白胨2.5g
葡萄糖2.5g
磷酸氢二钾2.5g
蒸馏水500ml
制法：
a)将上述成分混合于蒸馏水中，加热溶解后，调pH至7.2。
b)分装于120支试管中，每管5ml。0.06MPa灭菌30min。
3)胰蛋白胨水培养基（用于吲哚实验）
胰蛋白胨5g
NaCl
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