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第一次记录荧光现象1575西班牙内科医生、植物学家
荧光是光发射概念、引入荧光术语1852Stokes观察奎宁、叶绿素
提出用荧光作为分折手段1864Stokes
第一个实际应用、铝一桑色素荧光测1867
1965以来,荧光光谱兴趣激增，生物化学家利用它的高灵敏度。二十世纪七十年代后期，引起国内学者注意
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（MolecularLuminescenceAnalysis）;;2、去活化过程
溶液中：10-14-10-12s10-13-10-11s10-2-10-6s
振动弛豫内部转换体系间的跨越
（发生在相同多重度间）（发生在不同多重度间）
S2S1T1(＜S1)T2
10-15sA1A2FP磷光发射
10-2-10s
基态S0
荧光发射外部转换
10-7-10-9s发生在不同电子能态间
（熄灭）;;;;;３、荧光的一些基本问题
c.激发光谱和荧光光谱
(1)激发光谱(2)荧光光谱
注意：１、实际测得的荧光光谱和激发光谱随仪器而异,其真实光谱必须要对其光源、单色器、检测器的光谱特性加以校正
２、真实的激发光谱与吸收光谱非常近似，而不是相同;;;;;4、荧光、磷光的测量
一般荧光分光光度计与紫外可见区吸光光度计异同
单束(５％光用于校正)
⊥;;;;;5、影响荧光发射因素
a.强荧光物质的结构特点
（１）?→?﹡比n→?﹡有利φf↑
（２）共轭?体系φf↑
（３）刚性平面结构φf↑
（４）取代基影响◆给电子基团φf↑
◆吸电子基团φf↓(φp↑)
◆取代基位置:邻、对φf↑
◆重原子取??基φf↓(φp↑)
;5、影响荧光发射因素
b.溶液环境因素
（１）溶剂◆取决于荧光体和溶剂的化学结构
(溶剂～荧光物成化合物,荧光分子电离状态改变)
λf.maxφf都有影响
◆重原子溶剂存在时φf↓(φp↑)
外重原子效应
（２）温度T↑φf↓
（３）pH平衡解离关系存在λf.maxφf均有影响;6、溶液荧光的猝灭
定义：荧光分子与其它分子相互作用，改使荧光强度下降。
猝灭过程实质题与发光过程相互竞争、缩短发光分子激发态寿命的过程，具体形式机理各不相同。
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