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临床酶学检验技术

临床酶学的实际应用可以追溯到上世纪初，至今已有百年的历史。到

上世纪30年代，脂肪酶（LPS）、淀粉酶（AMY）、碱性磷酸酶（ALP）、

酸性磷酸酶（ACP）开始用于临床。尤其在1959年，Karmen、LaDue、

Wroblewski等人建立了分光光度法，使得丙氨酸氨基转移酶（ALT）、

门冬氨酸氨基转移酶（AST）、肌酸激酶（CK）、乳酸脱氢酶（LD）

等酶活性测定应用于肝胆疾病、心脏疾病的诊断。他们建立的连续监

测法和酶偶联技术直到现在仍是最常用的酶活性检测方法。酶这一生

物催化剂，在正常机体代谢中起着重要的作用。在病理情况下，尤其

一些细胞内酶，当细胞损伤时会释放到体液中造成体液中酶量或酶活

性的改变，这就是酶可作为诊断指标的依据。因为有一些酶在不同器

官、组织、细胞内的分布和定位存在明显差异，而且在细胞内外有明

显浓度梯度差，所以酶与其它指标相比具有更高的诊断特异性和灵敏

度，这就引起临床病理学家和临床医生的极大关注，使酶学得到迅猛

发展。上世纪60年代以后，人们发现同工酶及同工酶亚型比总酶活

力具有更高的诊断特异性和灵敏度，使临床酶学领域有了更广阔的发

展前景。随着免疫学和其它技术的渗透，测定酶质量成为可能。测定

酶质量与测定酶活性相比，可以测定无活性的酶，且不受抑制剂的影

响，因此，可以提供新的临床信息。酶具有高效催化性和高度特异

性决定了酶作为试剂的生物化学方法具备很多优点：如反应条件温

和，不需强酸强碱，不需高温；方法特异性高，可直接测定体液中某

组分；反应速度快；灵敏度高等等。因此，以酶试剂方法为代表的生

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物化学法必将取代化学法。酶作为催化剂，在反应前后无明显变化，

即酶可反复使用，近年来以固相酶技术为核心的生物传感器技术的应

用和开发研究正如火如荼地进行，可以预测我们将很快进入生物传感

器时代。

第一节酶含量的表示方法

酶具有高效催化性，极少量的酶可催化大量底物进行反应。理论上说，

在底物足够和酶未失活的前提下，酶与底物孵育足够长的时间可以产

生足够量的产物。若检测单位时间的产物或底物变化量要比直接测定

酶蛋白量显然容易得多。这种用酶促反应的速度来间接反应酶含量的

方法就是通常所说的酶催化活性的测定。根据酶催化活性来表示酶含

量的方法也称为相对定量法。相对的含义还包括酶催化活性易受测

定条件的影响。由于酶催化活性的测定方法简便快速，因此绝大多数

的酶都是用此法测定。

一、酶的催化活性

（一）酶活性单位历史上曾经使用很多酶催化活性的惯用单位，

是以方法提出者的姓氏来命名的，他们根据当时的实验条件，提出各

自的时间单位和产物或底物量的单位。例如谷丙转氨酶就有赖氏单位

（Reitman-Frankel）、金氏单位（King）、卡门氏单位（Karmen）、穆

氏（Mohun）单位等等。1963年国际生化协会酶学委员会通过广泛讨

论，提出一个国际单位（IU）来表示酶量的多少。国际单位定义：在

特定条件下，1分钟能转化1微摩尔底物（μmol/min）的酶量为一

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个国际单位。由于测定条件（如温度）不同，所转化底物的量将有明

显差异。为避免临床上误认为只要是同一国际单位的酶量在国际上无

论何处所测结果都相同，目前大多数实验工作者常省略国际二字（简

写也由IU改为U）。几乎都习惯用U/L来表示体液中酶活性即酶活性

浓度。1979年，国际生化协会为了使酶活性单位与国际单位SI制相