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PCR实验室建设

建立PCR实验室的基本条件

PCR技术在临床基因诊断中得到广泛应用，但由于其对

核酸模板进行大量扩增，实验室污染可能导致临床检测标本假

阳性结果。此外，PCR技术要求高，影响因素多，实验过程

处理不当易导致核酸模板无扩增现象，导致临床标本假阴性结

果。因此，PCR实验室的技术验收和规范化管理是PCR技术

本身需要，也是在临床上顺利应用该技术的前提。

建立PCR实验室的基本条件包括以下几点：

一、PCR实验室验收准备工作

一）硬件准备——实验室基本建设

1.根据文件要求，临床基因扩增检验实验室原则上分为四

个单独的工作区域：试剂贮存和准备区；标本制备区；扩增反

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应混合物配制和扩增区；扩增产物分析区。如果使用全自动封

闭分析仪器检测，则不需要扩增产物分析区。

2.各工作区域必须有明确的标记，避免不同工作区域内的

设备、物品混用。

3.进入各工作区域必须严格按照单一流向进行，即试剂贮

存和准备区→标本制备区→扩增反应混合物配制和扩增区→扩

增产物分析区。

4.不同的工作区域使用不同的工作服（不同的颜色）。工

作人员离开各工作区域时，不得将工作服带出。

5.工作区域仪器设备配置标准：

1）试剂贮存和准备区：2～8℃和-15℃冰箱；混匀器；微

量加样器（覆盖1～1000μl）；移动紫外灯（近工作台面）；

消耗品：一次性手套、一次性吸水纸、耐高压处理的离心管和

加样器吸头（带滤心）；专用工作服和工作鞋；专用办公用品

等。

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2）标本制备区：2～8℃冰箱，-20℃或-80℃冰箱；高速

台式冷冻离心机；混匀器；水浴箱或加热模块；微量加样器

（覆盖1～1000μl）；可移动紫外灯（近工作台面）；超净工

作台，消耗品；一次性手套、一次性吸水纸、耐高压处理的离

心管和加样器吸头（带滤心）；专用工作服和工作鞋；专用办

公用品等。

3）扩增反应混合物配制和扩增区：核酸扩增仪；微量加

样器（覆盖1～1000μl）；可移动紫外灯（近工作台面）；消

耗品：一次性手套、一次性吸水纸、耐高压处理的离心管和加

样器吸头（带滤心）；专用工作服和工作鞋；专用办公用品等。

4）扩增产物分析区：视检测方法不同而定。基本仪器设

备如下：微量加样器（覆盖1～200μl）；可移动紫外灯（近

工作台面）；消耗品：一次性手套、一次性吸水纸、耐高压处

理的离心管和加样器吸头（带滤心）；专用工作服和工作鞋；

专用办公用品等。

软件建设——质量手册编写与实施、人才资源

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软件建设中，质量手册的编写是非常重要的一步，它是阐

明软件质量方针并描述质量体系的文件。质量手册规定了质量

体系的基本结构，是实施和保持质量体系应长期遵循的文件。

在临床基因扩增检验实验室中，质量手册的编写应依照卫

生部下发的两个文件，并结合本实验室实际情况编写适合本实

验室的切实可行的质量手册。质量手册的提纲应包括三部分：

质量方针和宗旨、工作制度和标准操作文件（SOP）。

质量方针和宗旨是制定临床基因扩增检验实验室的质量管

理目标和质量保证体系的结构体系和总方针。工作制度一般应

包括实验室的设置、布局及组织结构、实验