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硫酸铵的鉴定实验报告

沉淀反应实验报告

实验蛋白质的沉淀反应与颜色反应

一、实验目的

掌握鉴定蛋白质的原理和方法。熟

悉蛋白质的沉淀反应，进一步熟悉蛋白

质的有关反应。

二、实验原理

蛋白质分子中某种或某些集团可与

显色剂作用，产生颜色。不同的蛋白质

由于所含的氨

基酸不完全相同，颜色反应亦不完

全相同。颜色反应不是蛋白质的专一反

应，一些非蛋白物

质也可产生同样的颜色反应，因此

不能根据颜色反应的结果来决定被测物

是否为蛋白质。另

外，颜色反应也可作为一些常用蛋

白质定量测定的依据。蛋白质是亲水性

胶体，在溶液中的

稳定性与质点大小、电荷、水化作

用有关，但其稳定性是有条件的，相对

的。如果条件发生

了变化，破坏了蛋白质的稳定性，

蛋白质就会从溶液中沉淀出来。

三、实验仪器

1、吸管2、滴管3、试管4、

电炉5、ph试纸6、水浴锅7、移液

管

四、实验试剂

1、卵清蛋白液：鸡蛋清用蒸馏水稀

释10-20倍，3-4层纱布过滤，滤液放在

冰箱里冷藏

备用。

2、0.5%苯酚：1g苯酚加蒸馏水稀

释至200ml。

3、millon’s试剂：40g汞溶于60ml

浓硝酸（水浴加温助溶）溶解后，冷却，

加二倍体

积的蒸馏水，混匀，取上清夜备用。

此试剂可长期保存。

4、尿素晶体

5、1%cuso：1gcuso晶体溶于蒸馏

水，稀释至100ml446、10%naoh：10g

naoh溶于蒸馏水，稀释至100ml

7、浓硝酸

8、0.1%茚三酮溶液：0.1g茚三酮溶

于95%的乙醇并稀释至100ml.

9、冰醋酸

10、浓硫酸

11、饱和硫酸铵溶液：100ml蒸馏水

中加硫酸铵至饱和。

12、硫酸铵晶体：用研钵研成碎末。

13、95%乙醇。

14、醋酸铅溶液：1g醋酸铅溶于蒸

馏水并稀释至100ml

15、氯化钠晶体

16、10%三氯乙酸溶液：10g三氯乙

酸溶于蒸馏水中并稀释至100ml

17、饱和苦味酸溶液：100ml蒸馏水

中加苦味酸至饱和。18、1%醋酸溶液。

五、实验步骤

蛋白质的颜色反应

（一）米伦（millon’s）反应

1、苯酚实验：取0.5%苯酚溶液1ml

于试管中，加millon’s试剂0.5ml，电

炉小心加热

观察颜色变化。

2、蛋白质实验：取2ml蛋白液，加

millon’s试剂0.5ml，出现白色的蛋白质

沉淀，小

心加热，观察现象。

（二）双缩脲反应

1、取少量尿素晶体放在干燥的试管

中，微火加热熔化，至重新结晶时冷却。

然后加

10%naoh溶液1ml，摇匀，再加2-4

滴1%cuso4溶液，混匀，观察现象。

2、取蛋白液1ml，加10%naoh溶液

1ml，摇匀，再加2-4滴1%cuso4溶液，

混匀，观察

现象。

（三）黄色反应

取一支试管，加入1ml蛋白液及浓

硝酸5滴。加热，冷却后注意颜色变化。

然后再加入

10%naoh溶液1ml，观察颜色有什

么变化。

（四）茚三酮反应

取蛋白液1ml于试管中，加4-8滴茚

三酮溶液，加热至沸，即有蓝紫色出现。

蛋白质的沉淀

（一）蛋白质的盐析作用

1、试管中加蒸馏水3ml，加固体硫

酸铵至饱和。另一支试管加蛋白液2ml，

再加入饱和

硫酸铵溶