肌酸激酶测定SOP_CK临床意义_检验科生化项目SOP.pdf

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肌酸激酶测定SOP_CK临床意义_检验科生化项目SOP--第1页

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1检测原理

CK催化磷酸从磷酸肌酸到腺苷二磷酸(ADP)的转磷酸过程,产生腺苷三磷酸(ATP)。这种方式

形成的ATP用于在己糖激酶(HK)催化的反应中使葡萄糖磷酸化,生成的葡萄糖-6-磷酸盐由葡萄糖

-6-磷酸脱氢酶(G-6-PDH)氧化,同时还原磷酸烟碱腺嘌呤二核苷酸(NADP)。形成的NADPH引起的

在340nm处发生的吸光度变化,与CK活性直接成比例,因为其他反应物以不限制比率的数量存在,

可以使用双波长(340,405nm)技术来测量。

磷酸肌酸+ADPCK肌酸+ATP

Mg++,DTE,EDTA

ATP+葡萄糖HKADP+葡萄糖-6-磷酸盐

Mg++

++

葡萄糖-6-磷酸盐+NADPG-6-PDH6-磷酸葡萄糖内酯+NADPH+(H)

2标本采集与处理

2.1采血方法

空腹采不抗凝静脉血2~3ml。

2.2标本保存

采集后应及时送检。如果不能及时送检,应将标本及时离心后分离血清,避光置冰箱保存。室温

4h、4℃8~12h、冰冻3~4天能维持活性不变。

2.3注意事项

推荐选用血清。酶活性的高低易受标本采集时间的影响较大。避免溶血、脂血、黄疸。

3试剂和设备

3.1试剂

采用西门子医学诊断产品(上海)有限公司提供的试剂盒。

3.1.1试剂组成

试剂船1~6孔为己糖激酶4500U/L,G-6-PDH2800U/L,ADP1.88Mm,磷酸肌酸18.1mM,葡萄

糖11.65mM,NADP2.88mM,缓冲液,AK抑制物,激活剂物,片剂。

3.1.2试剂准备

直接使用。

3.1.3试剂保存

试剂2~8℃保存,有效期内稳定。

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3.2质控品

美国BIORAD液体多项质控品。

3.3校准品

西门子校准品。

3.4仪器

SIEMENSDIMENSIONXpandPlus/RxLMax全自动生化分析系统。

4操作程序

4.1检测过程流程

签收样品→离心→上机检测→审核报告→签发报告→标本保存。

4.2样品签收

严格按照标本接收程序签收标本。

4.3标本处理

以2500~3000r/min,离心6~10min,分离血清上机测定。如不能及时检测,分离血清于2-8℃保存。

4.4标本检测

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