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;为什么要进行种子扩大培养?;种子扩大培养:将保存在砂土管、冷冻干燥管中处于休眠状态的生产菌种接入试管斜面活化后,再经过扁瓶或摇瓶及种子罐逐级扩大培养而获得一定数量和质量的纯种过程。
一个由实验室制备到车间生产的过程;种子扩大培养应根据菌种的生理特性,选择合适的培养条件来获得代谢旺盛、数量足够的种子。这种种子接入发酵罐后,将使发酵生产周期缩短,设备利用率提高。;对种子的要求:
(1)菌种细胞的生长活力强
(2)生理性状稳定
(3)菌体总量及浓度能满足大容量发酵罐的要求
(4)无杂菌污染
(5)保持稳定的生产能力;6.1种子制备工艺;6.1.1实验室种子制备;★产孢子能力强的,及孢子发芽、生长繁殖快的菌种:固体培养基培养孢子,孢子可直接作为种子罐的种子。
如生产青霉素的产黄青霉菌
★产孢子能力不强的,或孢子发芽慢的菌种:
可用摇瓶液体培养法,获得菌丝体,作为种子。
如产链霉素的灰色链霉菌、产卡那霉素的卡那霉菌
;★不产孢子的细菌:
斜面菌种于32℃,培养18~24h,即可移入250mL茄子瓶斜面培养基上,或者1000mL三角摇瓶液体培养基上,再于32℃培养12h即可作种子罐种子。
如生产谷氨酸的棒状杆菌属、短杆菌属;6.1.2生产车间种子制备;移种方式:
主要采用差压法,由种子接种管道进行移种,要防止接受罐表压降至零,否则会引起染菌。;种子罐级数的确定;接种龄与接种量;●接种量:移入的种子液体积和接种后培养液体积的比例。
大多数抗生素发酵:7~15%
谷氨酸发酵(棒状杆菌):1%
接种量的选择:决定于生产菌种在发酵罐中生长繁殖的速度。
采用较大的接种量可以缩短发酵罐中菌丝繁殖到达高峰的时间,使产物的形成提前到来。但若接种量过多,往往使菌丝生长过快,培养液粘度增加,造成溶氧不足,而影响产物的合成。
接种量过小,延长发酵周期,往往还会引起其他不正常情况。;种子质量的判断;6.1.3种子质量的影响因素;6.2种子质量的控制措施
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