征求意见稿-野生稻田间试验耐寒性评价技术规范.docx

T/CAGDRSXX—2024

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野生稻田间试验耐寒性评价技术规范

1范围

本文件规定了野生稻田间试验耐寒性评价的测定仪器、鉴定方法和耐寒性分级标准的要求。

本文件适用于鉴定评价野生稻种子苗、种茎苗田间试验耐寒性。注：在不引起混淆的情况下，本文件中的“标准化文件”简称为“文件”。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T3543.4—1995农作物种子检验规程发芽试验

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。3.1

野生稻wildrice

未经人工驯化、自然生长在野外的稻谷植物，它们通常具有较强的抗病、抗虫、耐盐碱、耐旱等特性。

3.2

种子苗seedling

种子在适宜条件下萌发后形成的幼苗。3.3

种茎苗stemseedling

通过无性繁殖方式，利用野生稻的地下茎生长发育形成的苗。3.4

耐冷对照品种cold-tolerantcontrolcultivar

用作参照的具有已知耐寒特性的水稻品种。使用其作为对照，有助于评估和比较其他品种的耐寒性能。

3.5

耐寒能力值cold-tolerancevalue

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通过主成分分析和隶属函数值等统计方法，对多个耐寒指标进行综合评估，计算出的一个数值。这个数值称为耐寒能力值，它反映了水稻品种在苗期的耐寒能力，并作为评估和比较不同水稻品种间耐寒性能的一个量化标准。

4测定仪器

4.1数种设备

应符合GB/T3543.4—1995中5.1.1的规定。

4.2烘箱

烘箱的温度应设置为50℃,以打破种子休眠。

4.3培养皿

培养皿直径应为9cm，且铺有双层滤纸。4.4气候培养箱

控温范围应为0℃~50℃。

4.5培养室

培养室应符合GB/T3543.4—1995中5.1.2的规定。培养室环境条件应设置为28℃/26℃（12h光照/12h黑暗，光照强度12000Lx）

5鉴定方法

5.1种子苗耐寒性鉴定方法

5.1.1准备试验样品

选取充实饱满的野生稻种子，用数种设备或手工每组随机数取40粒。

5.1.2打破种子休眠

将数取的40粒参试野生稻的种子，放置烘箱中，先用45℃~50℃高温处理72h打破种子休眠。选取丽江新团黑谷为耐寒对照品种。

5.1.3恒温浸种催芽

将消毒（1%NaClO，25min）后的种子放在盛有蒸馏水的25mL烧杯中，置于气候培养箱中进行浸种处理，条件设置为“28℃,48h，遮光”。浸种完成后，将烧杯中的种子置于铺有双层滤纸的培养皿中，用双层纱布覆盖种子并添加适量蒸馏水（以滤纸湿润且培养皿倾斜的时候能倒出少许水为准），之后将培养皿置于气候培养箱中进行催芽处理，条件设置为“28℃,48h，遮光”。

5.1.4水培至两叶一心期

选取发芽状态良好的30粒种子水培盒（塑料材质，96孔，孔径6.3mm，水培盒总体长127mm宽87mm高114mm）上，用Yoshida水稻培养液进行培养，条件设置为“30℃,光照时长12h，光照强度12000Lx”。培养至两叶一心后，进行低温胁迫。

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5.1.5低温胁迫

4℃气候培养箱（12h光照/12h黑暗，光照强度12000Lx）生长3d后，选取长势一致的幼苗3～5株，用叶绿素仪测定第二叶上半部的叶绿素含量；将其根部取出，用根系分析仪测定根系的5个形态学指标，包括总根长、根平均直径、根表面积、根尖数和根的投影面积。将剩余幼苗转至培养室进行常温恢复生长。

5.1.6常温恢复生长

转至培养室恢复生长7天。

5.1.7统计黄叶率数

第8天统计黄叶率数。黄叶率=黄叶数/总叶数，其中黄叶面积超过整个叶片1/2的记为黄叶；每个野生稻重复3次。

5.1.8测定指标

测定指标应包括：

a)叶绿素含量；

b)根长；

c)根平均直径；

d)根表面积；

e)根尖数；

f)根的投影面积；

g)黄叶率=黄叶数/总叶数。

5.1.9数据处理与统计分析

5.1.9.1各综合指标的隶属函数值

主成分分析是一种可将多个变量转化为少数几个综合指标（即主成分）的多元统计方法。每个综合指标可涵盖原始变量的绝大部分信息，有效避免了指标间存在的信息重叠。将主成分分析得到的主成分值转化为隶属函数值，隶属函数值按式（1）计算：

u(Xj)=(Xj-