松树皮中原花青素的提取及抗氧化作用研究.docx

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松树皮中原花青素的提取及抗氧化作用研究

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孔德冰

【摘要】松树皮中的提取物质作为天然抗氧化剂已成为当前研究的主要课题之一。本试验以松树皮为原料，采用超声波辅助盐酸-乙醇浸取法对原花青素进行提取，以原花青素的提取量为评价指标，研究超声波作用时间、料液比、提取温度和提取时间对原花青素提取量的影响。以花生油的过氧化值（POV）为评价指标，探索原花青素花生油的抗氧化作用。试验结果表明，原花青素花生油均有一定的抗氧化作用。

【关键词】松树皮；原花青素；提取；抗氧化

松树皮，分布极广种类多，多数生长于我国的东北及华北地区，含有40种有效成分，其中以水溶性极高的原花青素居多。近年来随着人们对黄酮类活性物质的研究加深，松树皮的研究也愈来愈多，其高含量的抗氧化活性物质使松树皮提取物具有得天独厚的优势，其中抗氧化活性物质可应用于诸如化妆品、食品等多个领域。松树皮药用价值高，具有散热解暑，温中止血，回阳通脉，燥湿消痰的功效。

一、材料与方法

（一）原材料

松树皮，购于淘宝，产地吉林长白山，无虫害、无糜烂；

猪油，购于泽航家农产品，正常肥猪肉煎制，不含任何添加剂；

胡姬花牌花生油，购于康乐购超市，产地山东青岛。

（二）试验方法

1.工艺流程

新鲜树皮→预处理→超声波乙醇浸提→过滤→2次浸提→合并滤液→减压浓缩→色素浓缩液→测定吸光度→计算提取量

2.原花青素的提取

取一定量的松树皮，切成小块，在55℃下烘干过夜后将干松树皮片磨成粉末，粉末用60目筛过筛备用。

称取2g粉末，置于250mL锥形瓶中，按一定量的料液比加入提取剂（盐酸：乙醇（V：V）=1：9，盐酸为2M），超声波作用一定时间后，在一定水浴温度下提取一定的时间，之后按提取流程进行吸光度测定。

原花青素提取量（mg/g）=1000AV/abm。其中：A为吸光度；V为浓缩液的体积；a为原花青素的吸光系数（0.0775L/（g.cm））；b为液层厚度（1cm）；m为样品质量。

3.猪油和花生油过氧化值的检测

在50g猪油和花生油中分别加入1%的松树皮原花青素浓缩液，充分摇匀，对照组不加浓缩液，置于室温下，分别于第0d，第3d，第6d，第9d，第12d测量猪油和花生油的过氧化值，并进行空白檢测。过氧化值检测方法如下：精密称取油脂2-3g并注入250mL锥形瓶中，水浴中加热溶解，加入氯仿-冰乙酸混合物30mL，立即震荡并溶解。加入饱和碘化钾1mL，在暗处放置3min，取出后加水5mL，摇匀后立即用0.005M硫代硫酸钠进行滴定至淡黄色，加淀粉指示剂1mL，继续滴定至蓝色消失为止，记录使用的硫代硫酸钠的体积为V1，同时做不加油脂的空白试验记录使用的硫代硫酸钠体积为V2，平行三次试验。

过氧化值的计算：POV=（V1-V2）×0.005×0.1269/m×100

式中：V1-三次试验中消耗硫代硫酸钠的平均值；V2-三次试验中空白对照消耗硫代硫酸钠的平均值；0.005-硫代硫酸钠的浓度；0.1269-消耗1mL硫代硫酸钠相当、于碘的量；m-试样质量。

（三）单因素试验

通过对乙醇提取原花青素工艺的研究，以原花青素提取量为评价标准，进行单因素试验，对超声波作用时间、料液比、提取温度和提取时间四个因素对原花青素提取量的影响进行研究。

1.超声波作用时间对提取量的影响

采用超声波作用时间为5min、10min、15min、20min、25min共5个时间。按1：15加入提取剂，55℃水浴中提取2h，抽滤后滤渣进行2次浸提滤渣，合并滤液，减压浓缩得到较为纯净的原花青素。以提取量为评价指标进行评定。

2.料液比对提取量的影响

分别按照料液比为1：10、1：15、1：20、1：25、1：30的比例加入提取剂，选用最佳超声波作用时间，55℃水浴中提取2h，抽滤后滤渣进行2次浸提，合并滤液，减压浓缩得到较为纯净的原花青素。以提取量为评价指标进行评定。

3.提取温度对提取量的影响

采用提取温度（水浴温度）45℃、50℃、55℃、60℃和65℃，最佳超声波作用时间和最佳料液比进行试验，水浴中提取2h，抽滤后滤渣进行2次浸提滤渣，合并滤液，减压浓缩得到较为纯净的原花青素。以提取量为评价指标进行评定。

4.提取时间对提取量的影响

采用提取时间为1.0h、1.5h、2.0h、2.5h和3.0h共5个配比，按照上述三个单因素的最佳条件进行提取，抽滤后滤渣进行2次浸提滤渣，合并滤液，减压浓缩得到较为纯净的原花青素。以提取量为评价指标进行评定。

二、花生油过氧化值的检测结果

图1反映的是未添加原花青素的空白组和添加1%原花青素的对照组在时间作用下POV值的变化。由该图可知，随着时间的增长，添加原花青素的花生油明显比未添加原花青素的花生油的POV值更低，说明其被氧化的程度更低；并且随着时间的延长，原花青素