黑曲霉菌发酵产柚苷酶培养基配方的优化研究.docxVIP

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黑曲霉菌发酵产柚苷酶培养基配方的优化研究

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张桃桃张萍石彦鹏牛春

摘要[目的]筛选出黑曲霉菌发酵产柚苷酶的最优培养基。[方法]以沙氏琼脂培养基、马铃薯葡萄糖琼脂培养基、察氏琼脂培养基作比较;选出最适黑曲霉菌生长的固体培养基，对固体培养基进行优化，得出最佳固体培养基;通过对发酵培养基不同碳源种类、氮源种类和无机盐的筛选和优化，确定黑曲霉生长和发酵的最适培养基，再通过正交试验确定黑曲霉固态发酵产柚苷酶最优培养基。[结果]黑曲霉固态发酵产柚苷酶最优培养基组成为0.1%磷酸二氢钾，4%鼠李糖，1%葡萄糖，0.2%无水CaCl2，0.2%七水硫酸镁，0.1%硫酸铵，02%柚皮苷，2%豆粉。优化后的培养基（618U/g）比优化前的基础培养基（401U/g）的酶活提高了54.1%。[结论]该研究为后续进行菌种遗传改造与分子育种提供了原材料，并为大规模商业化生产奠定了良好的基础。

关键词黑曲霉;发酵培养基;单因素试验;正交试验

TS201.3A

0517-6611（2021）07-0170-04

Abstract[Objective]ToscreenouttheoptimalmediumforproducingnaringinasebyAspergillusnigerfermentation.[Method]SartresAGARmedium，potatoglucoseAGARmediumandTsarAGARmediumwerecompared.ThebestsolidmediumforAspergillusnigergrowthwasselectedandoptimizedtoobtainthebestsolidmedium.Throughselectionandoptimizationofdifferenttypesofcarbonsource，nitrogensourceandinorganicsaltsinthefermentationmedium，todeterminetheoptimalculturemediumforgrowthandfermentationofAspergillusniger，theoptimummediumforproducingnaringinasebysolidfermentationofAspergillusniger?wasdeterminedbyorthogonalexperiment.[Result]Theoptimalculturemediumwas：0.1%potassiumdihydrogenphosphate，4%sugarlee，1%glucose，0.2%anhydrousCaCl2，0.2%MgSO47H2O，0.1%ammoniumsulfate，0.2%naringin，2%soybeanmeal.Theenzymeactivityofoptimizedmedium（618U/g）was54.1%higherthantheoptimizedbasemedium（401U/g）.[Conclusion]Itprovidedrawmaterialsforgeneticmodificationandmolecularbreeding，andlaidagoodfoundationforlargescalecommercialproduction.

KeywordsAspergillusniger;Fermentationmedium;Singlefactortest;Orthogonaltest

作者簡介张桃桃（1990—），女，宁夏银川人，助理工程师，从事生物制药研究。*通信作者，助理工程师，从事微生物发酵菌种选育、菌种管理工作。

柚汁是一种老少皆宜的饮品，味苦，具有很好的保健作用，其苦味的成分是柚皮苷。柚皮苷是一种二氢黄酮类化合物，由α-L-鼠李糖苷和β-D-葡萄糖苷组成。柚苷酶由α-L-鼠李糖苷酶和β-D-葡萄糖苷酶组成的一种复合酶系[1]，利用酶脱法可使柚苷酶和柚皮苷发生反应去除苦味。柚苷酶通常是由黑曲霉或青霉产生的可水解柚皮苷的糖苷酶[2]，柚苷酶不仅在食品行业中应用于果汁脱苦[3]、葡萄酒增香，而且在黄酮类药品加工和转化过程中具有重要的应用价值。然而，柚苷酶的来源主要从国外进口，价格昂贵，国内没有工业化生产，其原因主要是缺少适合工业化生产的