微工第2章培养基制备与灭菌.pptVIP

三、加热灭菌的原理

加热灭菌的原理:根据微生物在温度超过最高温度时,细胞中原生质体和酶的基本成分—蛋白质发生不可逆的凝固变性,使微生物在很短时间内死亡这一特性进行的。1.、微生物的热阻：微生物对热的抵抗力；*第二章培养基制备与灭菌*（1）微生物对热的抵抗能力营养细胞：60℃，10min；细菌芽孢：100℃，几分钟甚至几小时嗜热菌的芽孢：120℃，39min或更长时间（2）致死温度：杀死微生物的极限温度。（3）致死时间：在致死温度下，杀死全部微生物所需要的时间。在致死温度以上，温度愈高，致死时间愈短。*第二章培养基制备与灭菌**第二章培养基制备与灭菌*糖蜜的分级甘蔗糖蜜：棕黄色至黑褐色的均匀浓稠液体要求：无夹杂物，无异臭味，无发酵迹象，含糖分与微生物的数量不同而分为三级，各地区要求不同四川内江糖厂的糖蜜按下列要求分三级：一级糖蜜：含糖分为58~65％；含微生物1.0~9.0万个／1克二级糖蜜：含糖分为52~58％；含微生物15~50万个／1克三级糖蜜：含糖分为46~52％；含微生物100~800万个／1克广东顺德糖厂的糖蜜按下列要求分三级：一级糖蜜：含糖分为50％以上；二级糖蜜：含糖分为48——50％；三级糖蜜：含糖分为48％以下。糖蜜特点*第二章培养基制备与灭菌*干物质浓度很大糖分高产酸细菌多灰分与胶体物质很多如果不预先进行处理，微生物是无法直接进行发酵的。因此必须进行预处理。稀释、酸化、灭菌、澄清*第二章培养基制备与灭菌*稀释：发酵糖浓度的需要酸化：防止杂菌的繁殖，加速糖蜜中灰分与胶体物质沉淀，同时调整稀糖液的酸度，使适于酵母的生长。灭菌：糖蜜中常污染大量的微生物，大致包括野生酵母，白念球菌以及乳酸菌一类的产酸菌。为了防止糖液染菌需灭菌。澄清：糖蜜中含有很多的胶体物质、灰分和其它悬浮物质，它的存在对酵母的生长与酒精发酵均有害，故应当尽可能除去二、糖蜜前处理的方法*第二章培养基制备与灭菌*1、加酸通风沉淀法（冷酸通风处理法）：糖蜜加水稀释到500Bx→加入0.2～0.3％浓硫酸，通入压缩空气1h→静置澄清8h，取上清液。通风一方面可赶走SO2或NO2等有害气体以及挥发性酸和其他挥发物质；另一方面可增加糖液中的含氧量，提高糖液的溶氧系数，以利酵母的增殖。2、加热加酸沉淀法（热酸通风沉淀法）：糖蜜加水稀释到40％→加适量硫酸调节pH值到4～4.5→放入澄清槽加热至80～90℃，通风30min→保温70～80℃→8～12小时，取上清液。*第二章培养基制备与灭菌*3、添加絮凝剂澄清处理法：糖蜜稀释至30～40Bx→加硫酸调pH3～3.8→加热至90℃→添加8ppm聚丙烯酰胺（PAM），搅拌均匀→静置1小时，取上清液。*第二章培养基制备与灭菌**第二章培养基制备与灭菌*糖蜜使用的注意点：除糖份外，含有较多的杂质，其中有些是有用的，但是许多都会对发酵产生不利的影响，需要进行预处理。例：谷氨酸发酵有害物资：胶体成分（起泡、结晶）、钙盐（结晶）生物素（发酵控制）预处理：澄清→脱钙→脱除生物素例：柠檬酸发酵有害物质：铁离子含量高（导致异柠檬酸的生成）预处理：→黄血盐三、谷氨酸发酵糖蜜前处理

1.糖蜜预处理法活性炭处理法树脂处理法亚硝酸处理法2.添加化学药剂处理法添加青霉素法添加表面活性剂添加抗氧剂法*第二章培养基制备与灭菌*3.追加糖蜜法4.营养缺陷型变异株法第四节其他原料的处理一、纤维素及发酵废液的处理（一）、利用纤维素废料生产生物柴油、单细胞蛋白稻草、麦秆、玉米的茎和叶、甘蔗渣、废纸等流程如下：*第二章培养基制备与灭菌**第二章培养基制备与灭菌*纤维原料粉碎水解中和澄清过滤发酵罐培养分离废液种子营养盐菌体浓缩磨碎干燥成品

（二）利用柠檬酸中和滤液生产酵母

*第二章培养基制备与灭菌*酵母菌种斜面一级种子二级种子离心分离中和废液盐酸调pH3.5发酵干燥粉碎包装二次废液用于发酵培养基的配置等二、亚硫酸盐废液的处理（一）亚硫酸盐制浆废液生产酒精和蛋白质1、亚硫酸盐纸浆废液生产酒精2、亚硫酸盐纸浆废液发酵生产蛋白质3、亚硫酸铵法非木材制浆废液培养单细胞蛋白（二）亚硫酸盐废液发酵生产乳酸三、木屑水解液发酵生产衣康酸*第二章培养基制备与灭菌*第五节生