氨基酸近年原文.ppt

Edman反应NCS＋40℃，弱碱NCNHRCHCOS40℃，H+、硝基甲烷COOHH2NCHRPITC异硫氰酸苯酯PTC-氨基酸苯氨基硫甲酰氨基酸PTH-氨基酸苯乙内酰硫脲氨基酸HNCNHRCHCOOHS可用层析法鉴定出aa的种类（一）α－NH3参加的反应：4.形成西佛碱反应：与醛反应氨基酸的α-氨基能与醛类化合物反应生成弱碱——西佛碱。西佛碱是以氨基酸为底物的某些酶促反应（如：转氨反应）的中间物。5.酶促脱氨基反应：氨基酸在体内经氨基酸氧化酶催化（即脱α-氨基）而转变成酮酸。（一）α－NH3参加的反应：6．与荧光试剂反应：用于蛋白质的标记，修饰，游离氨的测定（Lys）荧光胺：+RNH2PH9，室温过量的荧光胺在1分钟内被水解。λ激发=390nm，λ发射=475nm荧光性（一）α－NH3参加的反应：邻苯二甲醛：+RNH2+SH-R’λ激发=340nm，λ发射=455nm荧光性（二）α－COOH参加的反应：成盐和成酯反应（－COOH保护）当氨基酸的羧基变成甲酯、乙酯或钠盐后,羧基的化学反应性能即被掩蔽——羧基被保护,而氨基的化学反应性能得到加强——氨基被活化,容易和酰基或烃基结合,这就是为什么氨基酸的酰基化和烃基化需要在碱性溶液中进行的原因。成酰氯反应（－COOH活化）氨基酸的氨基用适当的保护基（如：苄氧甲酰基）保护后,其羧基可与二氯亚砜或五氯化磷作用生成酰氯，使氨基酸的羧基活化,使它容易与另一氨基酸的氨基结合。（二）α－COOH参加的反应：酶促脱羧和化学脱羧反应：在体内经氨基酸脱羧酶催化，释放CO2，生成相应的一级胺。在体外:NH2—CH—COOHBa(OH)2，ΔRCH2NH2+CO2R叠氮反应（－COOH活化）氨基酸的氨基通过酰化加以保护,羧基经酯化转变为甲酯,然后与肼和亚硝酸反应即变成叠氮化合物。此反应使氨基酸的羧基活化，用于肽的人工合成。（P138）还原性茚三酮OOOHH＋NH3＋CO2＋RCHO水合茚三酮＋RCH－COOHNH2OOO＋2NH3＋OOOHHOOOO＋NH4NO＋3H2O蓝紫色化合物OO反应分2步：茚三酮反应常用于aa的定性和定量分析（三）α－NH3和α－COOH共同参加的反应：1.与茚三酮反应：Pro的茚三酮反应呈黄色,λ=440nmλ=570nm（三）α－NH3和α－COOH共同参加的反应：1.成肽反应：一个AA的氨基与另一AA的羧基可以缩合成肽，形成的键称为肽键。(P139)（四）R基参加的反应：氨基酸侧链上的功能团也能发生化学反应，如：羟基、酚基、巯基(包括二硫键)、吲哚基、咪唑基、胍基、甲硫基、非α-NH3、非α-COOH等。蛋白质的化学修饰（四）R基参加的反应：1.Tyr：（1）碘化或硝化——分别生成一腆Tyr、二腆Tyr、一硝基Tyr、二硝基Tyr；（2）Pauly反应：Tyr的酚基与重氮化合物(如：对氨基苯磺酸的重氮盐)结合生成橘黄色的化合物，可用于鉴定Tyr。（3）Millon反应（酚基反应）：Tyr+Hg(NO3)2(含HNO2的HNO3溶液)△红色化合物（4）Follin反应（酚基和吲哚基）：可用于测定Tyr和Trp含量。Tyr(Trp)+磷钨酸和磷钼酸还原兰色化合物（5）黄色反应（苯环反应）：Tyr(Trp,Phe)浓HNO3硝基苯衍生物（黄色）2.His：Pauly反应：呈棕红色3.Arg：（1）与环已二酮反应：