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分子生物学第二章拓扑异构酶的生物学功能b、防止细胞DNA的过度超螺旋多种拓扑异构酶的作用严格控制体内负超螺旋维持在5%水平。a、恢复由一些细胞过程产生的超螺旋如:复制叉前面正超的消除转录酶前正超的消除,后面负超的产生。分子生物学第二章类型1)Ⅰ型拓扑异构酶(topoisomeraseⅠ,topⅠ):2)II型拓扑异构酶(TopII)分子生物学第二章1)拓扑异构酶I(TopoⅠ):作用特点:作用于单链DNA不需要ATP和任何等辅助因子。对环状单链、双链DNA有打结或解结作用,以及使环状单链DNA形成环状双链DNA。分子生物学第二章拓扑异构酶I的作用分子生物学第二章2)拓扑异构酶Ⅱ(TopoⅡ):也叫DNA旋转酶(DNAgyrase)作用特点:作用双链DNA,需要ATP水解为ADP以供能量。能够环连或解环连,以及打结或解结。分子生物学第二章拓扑异构酶II的作用分子生物学第二章真核生物拓扑异构酶I真核生物拓扑异构酶II型真核生物拓扑异构酶分子生物学第二章练习题1、名词解释DNA变性、DNA的Tm、DNA复性、反向重复序列2、简答题DNA是否唯一的遗传物质?请问哪些条件可促使DNA复性(退火)?分子生物学第二章分子生物学第二章分子生物学第二章分子生物学第二章2反向重复与二级结构反向重复(invertedrepeatitiveIR):双链DNA中的一段序列按确定的方向,读双链中的每条链的序列都相同,反向重复中的序列又称回文序列。分子生物学第二章单链形成发夹结构分子生物学第二章形成十字结构要更耗能,所以在体外反向重复结构存在多,而体内无该结构。反向重复与十字结构分子生物学第二章作用:1)较短的回文序列可能是作为一种信号如:限制性内切酶的识别位点一些调控蛋白的识别位点例如限制性内切酶EcoRⅠ的识别位点5‘--GAATTC--3’3‘--CTTAAG--5’分子生物学第二章2)转录作用的终止与回文结构也有关系。
分子生物学第二章第四节二级结构的其他形式1单链核酸形成的二级结构2反向重复与二级结构3三螺旋DNA4DNA的四链结构分子生物学第二章???1953年WatsonCrick双螺旋DNA构型证明沿大沟存在多余的氢键作为给体与受体潜在的专一与DNA(蛋白质)?结合的能力形成三链DNA可能性3三螺旋DNA(triplehelixDNA)分子生物学第二章1957年Felsenfield发现:当双螺旋DNA中的一条链为全嘌呤链,另外一条链为全嘧啶链时,会出现核酸三链结构。poly(U)+poly(U)+poly(A)三螺旋RNA双螺旋DNA的概念分子生物学第二章三链DNA是由三条核苷酸链按一定的规律绕成的螺旋状结构。结构单元:三碱基体,结合方式:碱基间形成氢键;三螺旋双螺旋分子生物学第二章基本类型:嘧啶-嘌呤-嘧啶型(YR*Y):第三条嘧啶链以平行于双螺旋中嘌呤链的方向,缠绕到双螺旋的大沟上,与嘌呤链结合。如TA*T和CG*C;其中C必须质子化才能稳定三螺旋的结构,其碱基氢键构造是霍氏(K.Hoogsteen)首先提出,称为Hoogsteen霍氏氢键。嘌呤-嘌呤-嘧啶(YR*R):第三条嘌呤链反平行于双螺旋嘌呤链的方向缠绕到双螺旋的大沟上,与嘌呤链结合;如CG*G、TA*A、TA*T、CG*A四种。分子生物学第二章三链DNA可能的功能可阻止调节蛋白与DNA结合,关闭基因转录过程b)与基因重组,交换有关加入第三条DNA作为分子剪刀,定点切割DNA分子d)加入反义的第三条链终止基因的表达分子生物学第二章4DNA的四链结构(TetrableHelixDNA)分子生物学第二章DNA3’-末端较长的富含G序列能够形成回折结构(下图a和b),通过碱基间的非标准配对形成G的四链DNA(下图c和d)。在这样的结构中,G形成一种四联体,相互间通过霍氏氢键方式
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