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副溶血性弧菌;一.副溶血性弧菌的概述;本菌存活能力强,在抹布和砧板上能生存1个月以上,海水中可存活47天。
中毒食品主要是鱼、虾、蟹、贝类和海藻等海产品,其次为咸菜、熟肉类、禽肉、禽蛋类,约有半数中毒者为食用了腌制品后。中毒原因主要是烹调时未烧熟煮透或熟制品被污染.;副溶血性弧菌的流行病学;来源和传播途径
;副溶血性弧菌致病性;二、生物学特性;革兰染色阴性兼性厌氧菌,无芽孢,有鞭毛;菌体为多形态杆菌
或稍弯曲弧菌
;〔二〕生化反响
能分解葡萄糖、甘露醇产酸不产气,不发酵蔗糖,产生吲哚。致病菌株使人或家兔红细胞产生溶血。;
副溶血性弧菌检验程序
;〔二〕培养特性:;操作步骤
;增菌
;别离
;典型的副溶血性弧菌在弧菌显色培养基上呈圆形、半透明、外表光滑的粉紫色菌落,直径2mm--3?mm.?
;典型的副溶血性弧菌在TCBSL呈圆形、半透明、表而光滑的绿色菌落,用接种环轻触,有类似口香糖的质感,直径2mm--3?mm?。
;纯培养
;初步鉴定;3?%氯化钠三糖铁琼脂中的反响为底层变黄不变黑,无气泡,斜面颜色不变或红色加深,有动力。
;嗜盐性试验;嗜盐性试验
;确定鉴定;MR?试验方法?;VP试验方法;ONPG试验;甘露醇:阳性
右侧为阴性对照;靛基质:
阴性〔左〕;API2OE生化鉴定试剂盒或VITEK;API2OE生化鉴定试剂盒;试验项目;腌制生食动物性水产品微生物指标
GB10136-2005;报告;血清学分型〔可选择〕
;O抗原的鉴定:
将另外一管的菌悬液转移到离心管内,121℃灭菌1h。灭菌后4000rpm离心15min,弃去上层液体,将细胞浆弹起制成上层清液。用蜡笔将玻片划分成相等的间隔。在每个间隔内参加一滴菌悬液,将O群血清分别加一滴到间隔内,最后一个间隔加一滴生理盐水作自凝对照。轻微倾斜玻片,使各成分相混和,在前后倾动玻片1min。阳性凝集反响应可立即观察到。如果未见O群血清的凝集反响,将菌悬液121℃再次高压1h后重新检测。如仍旧为阴性那么培养物的O抗原属于未知。;传染病、寄生虫病、肿瘤、自身免疫病、变态反响性疾病确实诊。
在动物疫病的群体检验疫、疫苗免疫效果监测和流行病学调???。
生物活性物质的超微量检查、物种及微生物鉴定分型等方面。
基因别离,可怜筛选,表的产物的定性、定量分析和纯化。
;神奈川试验
;副溶血性弧菌检验培养基和试剂
;3%氯化钠胰蛋白胨大豆〔TSA〕琼脂
胰蛋白胨15.0g大豆蛋白胨5.0g氯化钠?30.0g琼脂?15.0g蒸馏水1000ml
3%氯化钠三糖铁〔TSI?〕琼脂
蛋白胨?15.0g月示蛋白胨?5.0g牛肉膏3.0g酵母浸膏?3.0g
氯化钠30.0g乳糖10.0g蔗糖?10.0g葡萄糖?1.0g
硫酸亚铁?0.2g苯酚红?0.024g硫代硫酸钠0.3g琼脂12.0g
水?1000ml
嗜盐性试验培养基
胰蛋白胨?10.0g氯化钠??(按不同量参加)蒸馏水??1000mlPH?7.2士0.2
;3%氯化钠甘露醇试验培养基
牛肉膏5.0g蛋白胨3g氯化钠3.0g磷酸二氢钠?2.0g
0.2%溴麝香草酚蓝溶液12.0ml蒸馏水1000.0mlPH?7.4
3%氯化钠赖氨酸脱狡酶试验培养基
蛋白胨?5.0g酵母浸膏3.0g葡萄糖1.0g蒸馏水???1000.0ml
1.6%溴甲酚紫-乙醇溶液?1.0mlL-赖氨酸0.5g/100ml或?1.0g/100ml
氯化钠30.0g水?1000.0ml
3%氯化钠MR-VP?培养基:
多胨7.0g葡萄糖?5.0g磷酸二氢钾?5.0g氯化钠30.0g蒸馏水1000ml
PH??6.9士0.2
我妻氏血琼脂
酵母浸膏?3.0g蛋白胨?10.g氯化钠?70.0g磷酸二氢钾?5.0g
甘露醇?10.0g结晶紫?0.001g琼脂?15.0g蒸馏水?1000.0ml
氧化酶试剂
1%盐酸二甲基对苯二胺溶液:少量新鲜配置,于冰箱内避光保存。
;备料单;操作步骤;序号
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