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分化型甲状腺癌BRAFV600E突变及超声造影与颈部淋巴结转移的相关性研究
甲状腺癌往往起病隐匿,且部分良恶性结节在影像学特征方面存在一定相似性,易出现漏误诊,从而不利于制定针对性治疗方案。超声造影检查可分为弱增强、等增强以及高增强,是评估良恶性甲状腺组织良恶性的重要指标,不过部分恶性结节有时也会出现等增强或者高增强。研究发现[1],分化型甲状腺癌患者早期也会出现淋巴结转移,有40%~60%的患者存在淋巴结转移。近年来,越来越多与侵袭性和临床管理相关的分子遗传特征被发现,包括鼠类肉瘤滤过性毒菌致癌同源体B1(V-rafmurinesacomaviraloncogenehomologB,BRAF)基因突变、端粒酶逆转录酶启动子突变、鼠类肉瘤病毒癌基因突变以及RET/PTC和PAX8/PPARγ重组等,而BRAFV600E基因突变为甲状腺癌常见基因突变类型之一[2-3]。研究发现[4],BRAFV600E基因突变与甲状腺癌患者的淋巴结存在密切关系。本研究分析了分化型甲状腺癌BRAFV600E突变及超声造影与颈部淋巴结转移的相关性,旨在为分化型甲状腺癌患者治疗及诊断提供参考,现将结果报告如下。
1资料与方法
1.1一般资料选取我院2021年7月—2022年12月收治的58例分化型甲状腺癌手术患者,对其一般资料进行回顾性分析。入选标准:(1)年龄在18周岁及以上;(2)均接受甲状腺癌根治术治疗,并经术后病理结果确诊为分化型甲状腺癌[5];(3)初次确诊者;术前未接受化疗或者放疗等治疗;(4)术前行超声造影检查,并接受BRAFV600E基因检测;(5)病历资料完整。排除标准:(1)过敏体质患者;(2)存在血液系统疾病、免疫系统疾病或者其他恶性肿瘤者;(3)凝血功能障碍或者心肝肾功能障碍;(4)伴有急性心肌梗死或者心绞痛;(5)存在颈侧区转移者。本研究符合《赫尔辛基宣言》要求。58例患者中,男12例,女46例;年龄30~69岁,平均年龄(48.13±5.37)岁;病灶数:累及单叶52例,累及双叶6例;TNM分期:Ⅰ期+Ⅱ期54例,Ⅲ期+Ⅳ期4例;颈部淋巴结转移:有16例,无42例;甲状腺外浸润:有3例,无55例;结节直径0.7~4.8cm,平均结节直径(2.04±0.36)cm。
1.2方法
1.2.1一般资料收集。基于回顾性分析研究方法由专人通过临床资料整理以及病历系统搜索获取58例分化型甲状腺癌手术患者临床资料资料,统计患者相关信息,包括性别、年龄、TNM分期、病灶数、有无颈部淋巴结转移、有无甲状腺外浸润、超声造影检查结果、癌组织标本中BRAFV600E突变情况以及病理检查结果等。
1.2.2BRAFV600E突变检测。58例分化型甲状腺癌患者均接受甲状腺癌根治术治疗,术前行超声引导下细针穿刺细胞学检查,通过细针穿刺细胞学检查抽取患者甲状腺癌组织标本及癌旁组织标本,通过DNA提取盒提取标本的DNA,将浓度符合要求的DNA样本稀释为100ng/μL,放置于-20℃冰箱中保存待用。通过实时荧光定量聚合酶链式反应仪进行荧光定量聚合酶链式反应扩增,引物序列采用BRAFV600E基因第15号外显子引物,引物序列如下,反向引物:5’-GGCCAAAAATTTAATCAGTGGA-3’,正向引物:5’-TCATAATGCTTGCTCTGATAGGA-3’,反应体系是28μL。扩增反应程序如下,预变性温度为96℃,时间为5min,变性温度为96℃,时间为40s,退火温度为58℃,时间为30s,延伸温度为72℃,时间为30s,共反应36个循环,最后72℃延伸5min。待测样品的反应管内荧光信号在达到设定临界值的时候所经历的循环阈值在30以下时,则可判断为BRAFV600E基因突变阳性(BRAFV600E突变组),在30以上则判断为BRAFV600E基因突变阴性(无BRAFV600E突变组)。
1.2.3超声造影检查。所有患者术前均接受常规超声诊断,再给予超声造影检查;通过飞利浦PHILISEPIQ7超声诊断仪进行超声检查,声诺维为上海博莱科信谊药业有限责任公司生产。协助患者取颈部过伸位,以确保甲状腺充分暴露;首先通过二维超声探头对患者每个甲状腺结节进行仔细观察,包括病灶数目、大小、边缘及位置等;常规超声诊断结束后,进行超声造影检查,固定探头位置,启动软件后注入声诺维,储存动态造影全程;根据声诺维达峰时结节回声的强度和正常甲状腺实质回声强度比较分为三种,分别为弱增强、等增强以及高增强,如果患者增强水平分布不均,则以大部分增强水平为主。
2结果
2.1分化型甲状腺癌组织和癌旁组织BRAFV600E突变率比较癌组织标本BRAFV600E基因突变阳性率高于癌旁组织,差异有统计学意义(χ2=59.3
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