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doi:10.3969/j.issn.1008-4754.2020.11.005
诊断是血吸虫病防治的重要组成部分,对血吸虫病诊断技术的研究与开发一直是热点方向。
近年来,我国血吸虫病的流行程度逐年降低,尤其是以控制传染源为主的综合防治策略的实施,对
我国家畜血吸虫病的诊断提出了新的要求,敏感特异的诊断技术再次成为传染源控制的中心问题。
随着分子生物学技术,特别是PCR技术的发展,血吸虫病核酸检测技术也逐步发展,并建立了部分
较好的方法。本文主要叙述了分子生物学技术在家畜血吸虫病诊断上的应用,以期家畜血吸虫病
分子生物学诊断在基层防治实践中进一步接受和推广。
PCR技术;诊断;家畜血吸虫病;应用与推广
作简介:李跻(1978—),男,分子生物学技术
宁夏永宁人,大学本科,高级兽医师,
主要从事畜牧兽医高新技术推广、重在家畜血吸虫病诊断上的应用
大动物病防控及动物疾病诊疗服
务工作。
李跻
(宁夏永宁县闽宁镇农业服务中心银川750104)
以间接血凝试验(IHA)为代表的血清学诊断技术逐步在我国2.1核糖体18SrRNA基因序列
家畜血吸虫病诊断中发挥越来越重要的作用,但其始终作为一种18SrRNA基因序列长度为1883bp,为血吸虫看家基因,拷贝
初筛的工具,不能作为确诊的依据。以粪便毛蚴孵化为代表的病原数较多,以其为靶标序列先后在日本血吸虫不同发育阶段的动物
学诊断技术是家畜血吸虫病确诊的“金标准”,但随着流行度和宿主的多种样本中检测到了特异性片段。基于该基因建立起了常
感染强度的进一步降低,其敏感性饱受诟病。检测核酸物质的方法规PCR、荧光定量PCR技术,检测限可达10fg,并且在感染的早
为家畜血吸虫病诊断开辟了新途径,在特定意上,核酸检测也属期即可检测到该靶标,提示18SrRNA靶序列的诊断价值。
于病原学检测的范畴,可作为家畜血吸虫病确诊的依据。另外,多2.2逆转录转座子SjR2
项研究证实,核酸检测具有较高的敏感性和特异性。核酸检测一般
SjR2具有高度保守和多拷贝的特点,长3,921bp,在基因组中
基于PCR技术建立,2002年,粪便PCR诊断技术首先应用于检
约有400个完整拷贝和23,755个不完全拷贝,分散在整个染色体
测曼氏血吸虫感染,其后,PCR诊断技术应用不断增多,并相继出
中,并可在血吸虫生活史多个阶段及动物宿主粪便和血清中检测
现诊断日本血吸虫和埃及血吸虫病的报道[1]。下面就将基于PCR
到。基于此靶基因建立起常规PCR、荧光定量PCR及LAMP法,其
及其延伸技术在家畜血吸虫病诊断上的应用介绍如下:
敏感性可达到80fg/μL和0.08fg/μL,并且可在感染早期扩增出特
1血吸虫核酸检测的可行性异性条带,并于治疗后一段时间转阴,除具有诊断价值外还具备疗
只要病原体存在于家畜或受体体内,机体内就会有其核酸物质效考核价值。
的存在,日本血吸虫生活史和寄生部位的特殊性决定了核酸检测技2.3线粒体基因
术的可行性。日本血吸虫尾蚴侵入家畜皮肤后转变
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