信息科技酸谈实验室.pdfVIP

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酸谈

辅修课

11表达操作:RNAi

主讲人猫大

信息科技|

第11颗表达操作:

RNAi

RNAi操作流程酸谈

PCR

siRNA

or

or

shRNAWB

重组

载体

siRNA或shRNA重组载体转染检测表达效果

◼siRNA设计

|陪伴医生科研成长

siRNA设计酸谈

1、文献中找

2、预设计的siRNA库

3、软件设计

一般的设计:AA(N19)TT

|陪伴医生科研成长

预设计的siRNA库酸谈

rnai/sirna/mission-predesigned-sirna.html/

在搜索框中输入名字搜索

◼首选的序列是已经验证过的

◼多选几个干扰靶点以排除脱靶效应

|陪伴医生科研成长

SigmashRNA结构分析酸谈

酶切位点+siRNA目标序列+loop+siRNA目标序列反向互补序列+TTTTT+酶切位点

CCGGCGGCGCACAGAGGAAGAGAATCTCGAGATTCTCTTCCTCTGTGCGCCGTTTTTG

loop

siRNA目标序列

siRNA目标序列反向互补序列

3’端悬垂

|陪伴医生科研成长

使用软件设计siRNA酸谈

|陪伴医生科研成长

构建shRNA载体酸谈

◼U6或H

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