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医学免疫学实验指导

病原生物与免疫学教研室

实验一免疫系统组织和细胞形态学

一、实验目的

观察小鼠胸腺、脾脏等免疫器官及免疫细胞

二、实验内容

机体免疫系统由免疫器官、免疫细胞、免疫分子组成。该系统具有识别和排除抗原性

异物、维持机体内环境稳定和生理平衡的功能，是执行体液免疫和细胞免疫的物质基础。

本次实验主要观察免疫器官大体解剖学、免疫细胞的形态学特征。小鼠是啮齿目中体形较小

的动物，淋巴系统很发达，包括胸腺、脾脏、淋巴管、外周淋巴结及肠道派氏集合淋巴结。

本实验在带教老师指导下，解剖小鼠，观察胸腺、脾脏等免疫器官，并制血涂片，观察小鼠

免疫细胞。

（一）小鼠免疫器官解剖学观察

【材料】

１动物：昆明种小白鼠。

２试剂：3%来苏尔水，瑞特氏染液。

３器材：眼科镊，眼科剪，玻片。

【方法】

１小鼠脱臼处死，投入盛有3%来苏尔水的缸内，浸泡5分钟。取出小鼠，仰卧位置

于试验台上，使动物腹部朝上。

２以镊子提起耻骨处皮肤，用剪刀沿正中线直剪开至下颌部，然后钝性分离皮肤，再

把皮肤向四肢剪开。

３注意观察腹壁，用剪刀沿正中线自阴部至膈肌为止剪开，观察腹腔液量及性状，观察脾

脏。

４切开膈肌，剪断胸骨，翻起胸骨，观察胸腺、心脏及肺脏，胸腺位于小鼠胸腔心脏前上

方，内有许多大淋巴细胞（即前胸腺细胞）及特定的上皮网状细胞（分泌胸腺激素）。

５解剖结束，深埋动物。

（二）免疫细胞的形态观察

【材料】

１动物：昆明种小白鼠。

２试剂：3%来苏尔水，瑞特氏染液，pH8.6硫酸盐缓冲液，20%盐酸甲醇。

３器材：眼科镊，眼科剪，玻片。

【方法】

１准备洁净玻片两张，一张用于推片，另一张用于固定标本。

２剪断小鼠尾巴取血或小鼠眼球取血，迅速在玻片上涂血膜制备血涂片，自然干燥。

３瑞氏染色

（１）染色：甲醇固定标本２分钟（亦可省略），滴加瑞氏染液数滴覆盖血膜，染色１分

钟，再加等量的pH8.6硫酸盐缓冲液或新制蒸馏水，用洗耳球吹打，使之与染液混匀，静置

染色8～10分钟，弃去染料，水洗。

（２）脱色：用20%盐酸甲醇脱色，肉眼观察玻片呈粉红色为宜，显微镜下观察结果。

４细胞特征

Ｔ细胞：Ｔ细胞是由胸腺内的淋巴干细胞分化而成的，是淋巴细胞中数量最多、功能最复杂

的一类细胞，占外周血液淋巴细胞总数的75%～80%。Ｔ细胞体积较小，胞质少，核呈圆形，

常在一侧有小凹陷，染色质呈块状，较致密，故着色较深。多数Ｔ细胞寿命较长，可存活数

月至数年或更长。在抗原刺激下，Ｔ细胞经过多次分裂增殖，形成效应性Ｔ细胞。效应性Ｔ

细胞的存活期短，具有杀伤靶细胞的能力，但必须与靶细胞结合才能产生免疫效应。

Ｂ细胞：Ｂ细胞由骨髓中的淋巴干细胞分化而成，占血中淋巴细胞总数的10%～15%，数量

较少。细胞体积比Ｔ淋巴细胞略大。Ｂ细胞的结构，在光镜下与Ｔ细胞难以区别。Ｂ细胞生

存期一般较短，可存活数周或数月，也有寿命长达数年的。当Ｂ细胞受到抗原刺激后，增殖

分化为大量浆细胞。浆细胞可合成和分泌抗体（免疫球蛋白），抗体在血液中循环。通过抗

体与抗原结合，可中和毒素，抑制细菌或靶细胞的代谢，溶解靶细胞，从而清除相应抗原并

促进巨噬细胞吞噬抗原。

NK细胞：自然杀伤细胞，由骨髓中淋巴干细胞分化而来，占血中淋巴细胞总数的2%～5%，

在人体内分布广泛，以外周血和脾、淋巴结中NK细胞活性最高。在中空器官的管壁固有层

和一些实质性器官的间质中，均有NK细胞存在。在骨髓中NK细胞活性较低。NK细胞是大

淋巴细胞，平均直径为12～15μｍ，胞质较多，在胞质内有许多大小不等的嗜天青颗粒，故

又称大颗粒淋巴细胞，核呈卵圆形。NK细胞不需抗原激活，更不需抗体的协助，它可直接

杀伤靶细胞，例如杀伤被病毒感染的细胞和肿瘤细胞，NK细胞的这种抗感染和抗肿瘤的杀

伤作用是广谱的。

DC：树突状细胞，是一类形状不规则的非单核吞噬系统细胞，特点是胞浆有许多长突起呈

触须状，使整个细胞的形态像一个蜘蛛。树突状细胞分散于全身的上皮组织和实质性器官，

其细胞数量不超过局部细胞总数的1%；也可迁移到血液和淋巴，其数量不超过血液有核细

胞总数的0.1%。树突状细胞的吞噬能力较弱，但细胞表面积大，且有丰富的MHCⅡ类分子，

所以捕获抗原和递呈抗原的能力很强。

单核巨噬细胞：单核细胞发生于骨髓的多能干细胞，循环于血液中，穿透血管内皮进入组织

内，转变为巨噬细胞。单核吞噬细胞系统在体内分布广，细胞数量多，主要分布于疏松结缔

组织、肝、脾、淋巴结