2.1《微生物的实验室培养》课件(2).ppt

选修1专题二课题1微生物的实验室培养二.无菌技术思考：1.什么是无菌技术？包括哪些方面？2.无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还有什么目的？（P15旁栏思考）3.消毒和灭菌有何不同？4.常用的消毒和灭菌方法有哪些？科目三考试科目3实际道路考试技巧、视频教程三.实验操作---大肠杆菌的纯化培养（一）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基计算－称量－溶化－灭菌－倒平板（二）纯化大肠杆菌最常用的接种方法有：平板划线法和稀释涂布平板法结果分析与评价课题延伸选择培养基*3.成分：思考：各种培养基的具体配方不同，但一般都包括哪些成分？水、无机盐、碳源、氮源、（生长因子）+满足微生物对pH、特殊营养物质、氧气的要求C无菌技术：泛指培养微生物操作中，所有防止杂菌污染的方法。无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。C3.常用的消毒方法：煮沸消毒法，巴氏消毒法，紫外线或化学药剂消毒法常用的灭菌方法：灼烧灭菌干热灭菌高压蒸汽灭菌：100kPa121℃15-30min判断下列各项是否需要消毒或灭菌。如需要，选择合适方法。（1）豆浆（2）游泳池（3）超净工作台（4）玻棒、试管、吸管、锥形瓶（5）培养细菌用的培养皿（6）无菌水（7）牛肉膏蛋白胨培养基（8）接种环、接种针（9）实验操作者的双手牛奶接种室、接种箱或超净工作台接种工具，接种环、接种针或其他金属用具玻璃器皿（吸管、培养皿）科目四考试科目四模拟考试题C1科目四仿真考试（冷却至50℃）涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求，想一想，第2步应如何进行无菌操作？应从操作的各个细节保证“无菌”。例如，酒精灯与培养皿的距离要合适、吸管头不要接触任何其他物体、吸管要在酒精灯火焰周围等等。菌种的保存1、临时保藏法：对象：温度：缺点：2、甘油管藏法：对象：温度：（P20）频繁使用的菌种4℃（冰箱）容易被污染或产生变异长期保存的菌种-20℃（冷冻箱）接种环接种针倒平板讨论1，2讨论3，4平板划线法讨论2，31.为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？操作的第一步灼烧接种环：每次划线前灼烧接种环：划线结束后灼烧接种环：避免接种环上可能存在的微生物污染培养物；杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得到菌落。及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。2.在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？3.在作第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线？以免接种环温度太高，杀死菌种。划线后，线条末端细菌的数目比线条起始处要少，每次从上一次划线的末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落涂布器